Trypsinizing e Subcultura células de mamíferos

Resumo

Como células atingir confluência, eles devem ser repicadas ou várias passagens. Este vídeo vai demonstrar um procedimento para a subcultura ambos os aderentes e células em suspensão.

Resumo

Como células atingir confluência, eles devem ser repicadas ou várias passagens. Falta de subcultura resultados confluentes células do índice mitótico reduzido e, eventualmente, na morte celular. O primeiro passo na subcultura é para separar as células da superfície do vaso cultura primária por tripsinização ou meios mecânicos. A suspensão celular resultante é então subdividida, ou reseeded, em culturas frescas. Culturas secundárias são verificados para o crescimento e alimentado periodicamente, e pode ser posteriormente subcultivadas para produzir culturas terciário. O tempo entre passaging de células varia com a linhagem de células e depende da taxa de crescimento.

Protocolo

O protocolo de texto completo para essa abordagem experimental está disponível em protocolos atuais em biologia celular .