Para começar, obtenha o cérebro dissecado do modelo de camundongo MCAO distal eutanasiado após o teste comportamental e coloque-o em um freezer de 20 graus Celsius negativos por 20 minutos. Em seguida, posicione o cérebro em uma matriz cerebral de um milímetro. E usando lâminas de microtom, corte o cérebro em seções coronárias de dois milímetros de espessura.
Transfira as seções cerebrais para uma placa de cultura de 24 poços e adicione 2% de TTC para cobrir o tecido cerebral. Incube a placa a 37 graus Celsius por 30 minutos. Em seguida, fixe cuidadosamente a seção cerebral em solução de paraldeído a 4% por 15 minutos.
Usando um scanister, execute a varredura óptica das seções cerebrais. A análise histológica do cérebro revelou o arranjo desordenado das células neuronais e uma redução significativa na densidade de células NeuN positivas na área peri-infarto dos camundongos ocluídos distal da MCA.
