Para começar, obtenha agentes anestésicos e analgésicos, gotas de dilatação, bisturi descartável estéril, tipos desejados de fórceps, agulhas, seringas e solução salina balanceada ou BSS. Esterilize os instrumentos cirúrgicos. Antes da anestesia, administre uma gota de 1% de atropina e 2,5% de fenilefrina para dilatar a pupila do olho submetido à cirurgia.
Usando uma agulha estéril de calibre 26 de meia polegada, prepare uma seringa com BSS estéril. Em seguida, prenda uma ponta dispensadora romba estéril de uma polegada e calibre 27 dobrada a 45 graus na seringa. Após a anestesia do camundongo, faça uma pinça do dedo do pé para confirmar a profundidade da anestesia, garantindo que a dilatação da pupila atinja dois milímetros.
Mova o mouse anestesiado para o estágio de um microscópio de luz de dissecação composto com uma almofada de aquecimento. Usando um bisturi cirúrgico estéril, faça uma incisão de um a 1,5 milímetro no centro da córnea, garantindo que a cápsula anterior do cristalino também seja incisada. Expulse suavemente uma gota de BSS acima da córnea para molhar a superfície para posterior manipulação.
Agora, insira a ponta dispensadora através da incisão central da córnea na incisão da cápsula da lente e mova suavemente a agulha em movimentos circulares enquanto libera lentamente o BSS para expelir a massa de fibra da lente. Assim que a massa de fibra aderir à ponta de distribuição, remova cuidadosamente a ponta de distribuição do olho interno. Limpe-o com uma toalha estéril para remover as células da fibra e repita até que todas as células da fibra da lente e o núcleo da lente sejam removidos.
Enxágue a cápsula da lente com BSS estéril para remover quaisquer fibras restantes. Observe a aparência translúcida ou vítrea para confirmar que a cápsula está dentro do olho. Para fechar a incisão da córnea, primeiro, segure um retalho da córnea usando uma pinça na mão não dominante e empurre a agulha com fio de náilon através dele.
Em seguida, empurre-o através do próximo retalho da córnea. Coloque um ponto de nó quadrado na parte central da incisão e apare o excesso de linha. Coloque a agulha dobrada através da lacuna da córnea acima ou abaixo da sutura recém-colocada e expulse suavemente o BSS para reinflar o olho.
Para cuidados pós-operatórios, aplique imediatamente uma gota de pomada oftálmica com eritromicina a 0,5% diretamente acima da sutura que cobre toda a incisão. Administre buprenorfina por via intraperitoneal. Permita que o mouse se recupere da anestesia em uma gaiola colocada em uma almofada de aquecimento para otimizar o suporte térmico e monitore até que ele se recupere.
