Induzindo a poda sináptica dependente da experiência de butirato de etila (EB) do receptor Or42a

Para começar, pegue o frasco contendo as larvas de drosófila. Usando um pincel fino, separe 40 a 50 pupas escuras de farato em frascos de drosófila de poliestireno contendo alimento padrão de melaço de fubá. Coloque uma fina tela de arame de aço inoxidável sobre a extremidade dos frascos de drosófila para conter as moscas, permitindo um bom fluxo de ar.

Prenda as tampas de malha de arame com uma fita transparente na lateral dos frascos. Em seguida, adicione um mililitro de óleo 100% mineral ou dissolva o EB em óleo mineral em tubos de 1,5 mililitro. Coloque esses tubos na vertical dentro de um recipiente de vidro de 3.700 mililitros.

Usando fita adesiva, ancore os tubos no centro das câmaras odoríferas, junto com os frascos de drosófila. Coloque o controle do veículo lacrado e as câmaras de odor EB contendo os frascos de pupas em uma incubadora umidificada em um ciclo de luz de 12 horas e escuro de 12 horas. Após quatro horas de exposição à câmara de odor, transfira rapidamente 20 a 25 moscas recém-fechadas para frascos de drosófila fresca em câmaras com odor recém-feito.

Mantenha as moscas em suas câmaras de odor seladas nas incubadoras por um total de 24 horas.