Para começar, injete subcutaneamente um mililitro de solução de Ringer com lactato misturada com 5% de glicose nos camundongos anestesiados. Use tesouras de pequenos animais para raspar uma área de dois centímetros na região abdominal do rato. Em seguida, faça uma incisão na linha média com um bisturi cirúrgico.
Abra a incisão com uma tesoura cirúrgica. Use um afastador abdominal para expandir a incisão, facilitando a tração suave do duodeno e de uma seção do intestino delgado com cotonetes estéreis e úmidos. Cubra as estruturas com um cotonete estéril pré-preparado para expor o segmento hepático da veia porta.
Para ligadura da veia porta, retire o peritônio e o trato intestinal. Cerque os ramos da veia porta principal com movimentos lentos, deliberados, para frente e espalhados. Identifique o ramo posterior direito, os ramos laterais e medianos esquerdos combinados e o ramo caudado.
Em seguida, para dissecar o ramo posterior direito, localize seu ramo proeminente e visível ao atravessar o hilo hepático através da veia porta principal. Use bolas de algodão umedecidas como agente de enchimento para separar o lobo médio do fígado do lobo posterior direito. Dissecar ao longo da cápsula de Glisson.
Puxe uma gravata de seda de 1,5 centímetro de comprimento ao redor dos galhos da veia porta. Em seguida, use um 8-0 sutura de seda para ligar o ramo posterior direito. Para a dissecção dos ramos lateral esquerdo e mediano, primeiro, disseque qualquer interstício potencial entre o lobo lateral esquerdo e o lobo caudado.
Em seguida, introduza um par de micro fórceps na entrada criada. Quando sentir resistência, ajuste ligeiramente a micropinça para se mover através da superfície da cápsula de Glisson do lobo medial direito. Empate em 8-0 sutura de seda ao redor da veia porta dos ramos lateral esquerdo e mediano.
A ligadura bem-sucedida pode ser observada pela demarcação isquêmica dentro do lobo médio do fígado com palidez no lobo esquerdo. Em seguida, disseque o lobo caudal. Preencha o espaço potencial entre a veia porta principal e o lobo caudado com um cotonete.
Retire o peritônio dos lobos caudados para visualizar os ramos da veia porta do lobo. Ligue o ramo caudado com uma sutura de costura, garantindo que o caminho da agulha envolva adequadamente o ramo caudado. Para transeccionar o fígado, use uma caneta de eletrocautério para criar uma linha pré-cortada de 0,5 milímetro ao longo da linha de demarcação no lobo médio do fígado.
Com um par de microfórceps e a caneta de eletrocautério, corte o tecido hepático. Limpe o sangramento com algodão. Remova a vesícula biliar na extremidade, pois ela fornece um bom ponto de tração através da transecção.
Use um cotonete para aplicar pressão controlada para hemostasia. Assim que a transecção e a colecistectomia estiverem concluídas, coloque cuidadosamente o intestino delgado de volta na cavidade abdominal. Feche o peritônio e a parede abdominal com suturas absorvíveis 6-0.
Desinfete a superfície da pele e, em seguida, injete subcutaneamente fentanil e meloxicam misturados com solução salina para aliviar a dor pós-operatória. Coloque o mouse em uma almofada termostática para facilitar o despertar. Transfira-os para gaiolas individuais quando recuperarem a consciência.
Injetar medetomidina por via subcutânea, continuando por 24 horas de pós-operatório. Os camundongos que foram submetidos à ALPPS mostraram maior propensão à proliferação celular. Os marcadores inflamatórios dos camundongos ALPPS, especificamente a interleucina-6, foram maiores do que os observados no grupo PVL.
