Para começar, pese cinco gramas de polímero superabsorvente seco ou SAP e misture com 500 mililitros de solução nutritiva MMS1. Aproximadamente uma semana antes da montagem, germinar sementes de plantago lanceolata em papel mata-borrão umedecido com solução nutritiva MMS1 em uma placa de Petri. Em seguida, incube a placa de Petri no escuro à temperatura ambiente.
Para iniciar a montagem do sistema SAP-AS, coloque o caule da muda no entalhe na lateral da placa de Petri com a raiz para dentro e os cotilédones ou folhas e caules para fora. Cubra as raízes com aproximadamente 1,5 a dois gramas de vermiculita. Em seguida, hidrate o compartimento radicular com oito mililitros de solução nutritiva MMS1.
Limpe um espaço livre de vermiculita ao longo do filtro de malha de náilon na lateral do compartimento da raiz e adicione cinco gramas de SAP hidratado. Em seguida, adicione 15 gramas de SAP hidratado ao compartimento de enchimento alto. Agora alinhe os entalhes laterais da tampa e o fundo da placa de Petri para evitar danificar a haste e feche a tampa.
Em seguida, sele a placa de Petri com uma tira de parafilme, unindo a base e a tampa. Pese a placa de Petri e registre seu peso médio para determinar quando o SAP-AS precisa de reidratação. Em seguida, empilhe as placas de Petri para otimizar o espaço.
Use uma cobertura opaca com uma abertura na lateral para manter as mudas no escuro. Usando uma vela de chama ou um bico de Bunsen, aqueça a pipeta de vidro e estique o tubo de vidro à medida que derrete para separá-lo. Sob um microscópio estéreo, quebre a ponta da pipeta de vidro para reduzir seu diâmetro interno.
Agora abra a placa de Petri e localize onde o esporo deve ser colocado. Limpe um espaço entre os cinco gramas de seiva hidratada ao longo da membrana do filtro de malha de náilon para expor uma seção de uma raiz. Sob o microscópio de dissecação, pegue um esporo em uma suspensão líquida com a pipeta extrudada, enquanto pipeta um pouco de líquido antes de coletar o esporo.
Depois disso, deposite cuidadosamente o esporo na raiz. Em seguida, substitua a seiva sobre o fragmento da raiz para manter um microambiente úmido para a raiz e o esporos. Após 24 horas, se necessário, irrigue o compartimento da raiz, tomando cuidado para não lavar o esporo.
Alinhe os entalhes laterais da tampa com o fundo da placa de Petri para evitar danificar o caule da muda e feche a placa de Petri com a tampa.
