Para começar, sujeite as plantas a várias condições de estresse, como seca, alagamento e calor. Transfira as plantas de seu local de cultivo para o sistema de fenotipagem, conectado a uma área tampão de crescimento para carregamento manual das plantas no sistema. Na plataforma de fenotipagem, coloque os potes nos discos que se movem automaticamente em uma esteira transportadora em determinados intervalos para o sensor de imagem.
Rotule cada planta ou bandeja com um ID exclusivo para garantir que os dados medidos sejam atribuídos corretamente à respectiva planta durante todo o experimento. Para otimizar o protocolo de fenotipagem usando vários sensores de imagem, acesse o agendador de tela da planta e crie novos experimentos. Clique em adicionar ação e selecione adicionar item de protocolo seguido de carregamento da bandeja.
Defina a luz de adaptação, selecione a medida e clique em adicionar receita. Selecione o sensor de imagem necessário e defina os ajustes para medir os parâmetros fisiológicos e morfológicos das plantas. Na plataforma de fenotipagem, certifique-se de que as plantas entrem no sistema através de um túnel de adaptação.
Capture a altura da planta primeiro e, em seguida, ajuste a altura de cada sensor com base em uma distância de trabalho fixa. Realize a primeira rodada de medições de fluorescência de clorofila em plantas adaptadas à luz usando um protocolo de luz curta para diferenciar as respostas das plantas a diferentes tratamentos. Em seguida, realize imagens térmicas para medir parâmetros fisiológicos sob tratamentos de estresse térmico.
Na segunda rodada, meça respostas mais lentas, como RGB estrutural e imagens hiperespectrais. Para a etapa de pesagem e rega, defina o peso de referência para cada planta, incluindo o peso do disco, inserção localizada na esteira transportadora, suportes azuis, esteiras azuis, vaso, solo e biomassa vegetal para permitir a rega e pesagem automatizadas para o tratamento dado. Use o software analisador de dados para extração automática, subtração de fundo e segmentação de máscara de planta do pipeline de processamento de imagem.
As características morfológicas, incluindo o volume de plantas e a taxa de crescimento relativo das plantas controle, aumentaram continuamente. No entanto, sob calor, calor combinado, seca e alagamento, esse aumento no volume da planta foi claramente reduzido. Como as plantas são muito suscetíveis ao estresse de alagamento, foi pronunciada uma diminuição na taxa de crescimento relativo.
As características fisiológicas dos dados de fluorescência da clorofila mostraram que o alagamento estava afetando negativamente a eficiência fotossintética em zero a cinco e seis a 10 dias de fenotipagem. Mas uma resposta de recuperação foi observada em 11 a 15 dias de fenotipagem. As plantas termográficas e alagadas mostraram que a temperatura delta foi elevada em comparação com os demais tratamentos em zero a cinco e seis a 10 dias de fenotipagem, indicando assim maior temperatura foliar, mas uma ligeira diminuição aos 11 a 15 dias de fenotipagem refletindo a fase de recuperação.
