Para começar, separe as fêmeas virgens de Caenorhabditis elegans do estágio 200 L4, fog-2, um dia antes da extração do feromônio. Distribua as fêmeas em três placas separadas de seis centímetros OP50 NGM. No dia da extração, transfira 100 fêmeas virgens de um dia de idade fog-2 para um tubo de microcentrífuga contendo um mililitro de tampão M9.
Após a última lavagem, incube as fêmeas em 100 microlitros de tampão M9 por seis horas a 20 graus Celsius para permitir a produção de feromônios. Da mesma forma, isole 15 a 20 fêmeas de Caenorhabditis remanei em estágio L4 em três placas OP50 NGM. Após a lavagem, incubar cinco fêmeas virgens em 100 microlitros de tampão M9 por seis horas a 25 graus Celsius.
Centrifugar as minhocas a 15 000 g durante 30 a 60 segundos. Transfira cuidadosamente o sobrenadante contendo feromônios para um tubo limpo. Descarte o tubo que contém o pellet de minhoca.
Armazene o extrato de feromônio sexual volátil coletado a menos 80 graus Celsius.
