Obrigado a Mauricio R. Delgado, Stephanie R. Potts e William T. O McCuddy. A aquisição dos dados representativos foi apoiada por financiamento do Instituto Nacional sobre Abuso de Drogas ao MRD (R01DA027764)

1. Criação do CPAW
Nota: o CPAW é versátil em seus componentes e construção. Embora este protocolo represente a abordagem tomada pelo autor, abordagens alternativas são possíveis.
<ol><li>Afixe de duas a três peças de Velcro (cada uma cerca de 4 em x 1 in) para cada um dos dois gelpacs (6 em x 12 de tamanho) usando cimento de borracha, igualmente espaçado. Deixe 24 horas secar.</li>
	<li>Obtenha um pedaço de tecido grosso aproximadamente 12 em x 16 em tamanho, dobre em meio comprimento. O exemplo 6 em x 12 em gelpacs será executado longitudinalmente ao longo de cada metade interna do tecido dobrado.</li>
	<li>Fixar o lado complementar de cada Velcro peça (do passo 1.1) para os lados internos do tecido, espaçados para que eles combinem a colocação da Velcro nos áles. Pode-se utilizar cimento de borracha ou agulha e linha. Isso permitirá que os gelpacs sejam facilmente removidos para limpeza e recolocados para armazenamento.</li>
	<li>Obtenha duas peças maiores de Velcro (aproximadamente 2 em x 10 in). separar. Corte um lado para cerca de um quarto do seu tamanho original (e descarte o restante) mantendo o outro no original 2 em x 10 de tamanho.</li>
	<li>Fixar o pequeno pedaço de Velcro na parte frontal e atrás da parte externa do tecido do mesmo lado. Finalmente, afixe a parte mais longa do Velcro aos locais análogos na porção externa do lado oposto do tecido. Depois que isso for concluído, deve ser possível envolver o tecido em torno do antebraço e da mão e fixá-lo no lugar usando as alças Velcro.</li>
</ol>2. Precauções de uso e segurança do CPAW
<ol><li>Informe os participantes dos estudos que utilizam o CPAW várias vezes, durante o consentimento e antes da administração do CPAW, que eles estão livres para retirar e encerrar o procedimento a qualquer momento. Recomenda-se três declarações de retirada discretas. Além disso, esteja preparado para encerrar o procedimento se o participante ficar angustiado.</li>
	<li>Exemplo Texto instrutivo: "Neste estudo, podemos pedir que participe de um procedimento de estresse que envolve colocar um envoltório de braço feito de gelpacs frios no braço por um período de tempo. O envoltório foi projetado para ser estressante, e, portanto, será altamente desconfortável. É importante que você entenda que é seu direito terminar o procedimento e experimentar a qualquer momento por qualquer motivo, se o envoltório do braço está atualmente em seu braço ou não. Para fazer isso uma vez na ressonância magnética você pode me dizer verbalmente, você pode chutar seu pé vigorosamente, ou se necessário você pode usar a bola de aperto de emergência que lhe daremos. Me entende? Você está disposto a continuar? Depois disso, é aconselhável que o participante seja lembrado mais duas vezes antes da ressonância magnética com a declaração: "Lembre-se, removeremos o envoltório do braço e terminaremos o experimento a qualquer momento".</li>
	<li>Armazene o CPAW em um congelador com uma temperatura cuidadosamente monitorada. Se o congelador não puder ser assediado a uma temperatura específica (por exemplo, entre 0-5 °C) e estiver abaixo de 0 °C, dê tempo para o CPAW aquecer a uma temperatura segura (não menos que 0 °C) depois de removê-lo do armazenamento. Caso contrário, existe o potencial para um participante experimentar uma queimadura fria.</li>
	<li>Antes de empregar o CPAW, cubra os gápris com uma camada de chapas plásticas para evitar contato direto entre os gelpacs e a pele do participante. Meça a temperatura da superfície de cada gelpac (coberto pela folha de plástico) usando um termômetro infravermelho em dois ou três locais ao longo de seu comprimento para garantir uma temperatura segura. Se a temperatura estiver muito baixa, deixe passar mais tempo e medir novamente.</li>
	<li>Quando a temperatura desejada for atingida, enrole o CPAW em torno do antebraço dos participantes e afixe-o manualmente com as alças Velcro acima mencionadas. Deixe o CPAW no lugar pelo período de tempo desejado (recomenda-se 2 min). Remova-o imediatamente após o pedido do participante ou após esse tempo ter transcorrido.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Sinha, R., Garcia, M., Paliwal, P., Kreek, M. J., Rounsaville, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress-Induced+Cocaine+Craving+and+Hypothalamic-Pituitary-Adrenal+Responses+Are+Predictive+of+Cocaine+Relapse+Outcomes.">Stress-Induced Cocaine Craving and Hypothalamic-Pituitary-Adrenal Responses Are Predictive of Cocaine Relapse Outcomes.</a> Arch. Gen. Psychiatry. 63 (3), 324-331 (2006).</li><li>Dias-Ferreira, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+stress+causes+frontostriatal+reorganization+and+affects+decision-making.">Chronic stress causes frontostriatal reorganization and affects decision-making.</a> Science. 325, 621-625 (2009).</li><li>Schwabe, L., Wolf, O. 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W., Tranel, D., Adolphs, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+memory+retrieval+correlates+with+individual+differences+in+cortisol+response+but+not+autonomic+response.">Impaired memory retrieval correlates with individual differences in cortisol response but not autonomic response.</a> Learn. Mem. 13, 382-387 (2006).</li><li>Duncko, R., Johnson, L., Merikangas, K., Grillon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Working+memory+performance+after+acute+exposure+to+the+cold+pressor+stress+in+healthy+volunteers.">Working memory performance after acute exposure to the cold pressor stress in healthy volunteers.</a> Neurobiol. Learn. 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H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+'Trier+Social+Stress+Test'--a+tool+for+investigating+psychobiological+stress+responses+in+a+laboratory+setting.">The 'Trier Social Stress Test'--a tool for investigating psychobiological stress responses in a laboratory setting.</a> Neuropsychobiology. 28, 76-81 (1993).</li><li>Kudielka, B. M., Hellhammer, D. H., Kirschbaum, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Social neuroscience: Integrating biological and psychological explanations of social behavior. , 56-83 (2007).</li><li>Dickerson, S. S., Kemeny, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+stressors+and+cortisol+responses:+a+theoretical+integration+and+synthesis+of+laboratory+research.">Acute stressors and cortisol responses: a theoretical integration and synthesis of laboratory research.</a> Psychol. Bull. 130, 355-391 (2004).</li><li>Schwabe, L., Haddad, L., Schachinger, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HPA+axis+activation+by+a+socially+evaluated+cold-pressor+test.">HPA axis activation by a socially evaluated cold-pressor test.</a> Psychoneuroendocrinology. 33, 890-895 (2008).</li><li>Smeets, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Introducing+the+Maastricht+Acute+Stress+Test+(MAST):+a+quick+and+noninvasive+approach+to+elicit+robust+autonomic+and+glucocorticoid+stress+responses.">Introducing the Maastricht Acute Stress Test (MAST): a quick and noninvasive approach to elicit robust autonomic and glucocorticoid stress responses.</a> Psychoneuroendocrinology. 37, 1998-2008 (2012).</li><li>Huettel, S. A., Song, A. 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Os autores não declaram conflito de interesses.

Neste artigo foi demonstrado uma alternativa ao teste tradicional de prensa fria - o envoltório de braço de prensa fria. CPAW é um procedimento que produz respostas psicofisiológicas e neuroendócrinas de estresse comparáveis ao CPT. Especificamente, foram observados aumentos robustos na ativação do SAM (ou seja,ans simpáticos) e aumentos leves a moderados na atividade hpa(ou seja,cortisol). O CPAW pode ser criado a partir de uma gama de componentes comumente encontrados, e serve como uma alternativa viável ao CPT tradicional (à base de água) uma vantagem adicional do CPAW é que ele pode ser facilmente empregado em contextos de pesquisa onde poderia ser impraticável, mesmo inviável, usar CPT(por exemplo, MrI).
Como mencionado anteriormente, o CPAW requer precauções adicionais de segurança além das associadas à CPT. Os critérios de exclusão (em grande parte compartilhados pela CPT) devem incluir: urticária fria, Doença de Reynaud, aneurisma, gravidez, histórico de doenças cardiovasculares, diabetes, doença reumatológica crônica e anormalidades na pressão arterial não tratadas. Dado que o CPAW pode potencialmente ser resfriado a temperaturas inseguras abaixo da água líquida, a medição rigorosa da temperatura antes da aplicação é fundamental para evitar o risco de lesões dos participantes. Como o aparelho está fisicamente preso ao braço do participante, é vital que fique claro em vários pontos que eles podem encerrar o procedimento a qualquer momento a seu pedido. Além disso, o experimentador deve estar preparado para encerrar o procedimento se o participante ficar angustiado. Assim, o procedimento exige que o pesquisador fique atento em múltiplas frentes.
Existem várias limitações no uso do CPAW. Por exemplo, no contexto dos estudos de ressonância magnética, uma ressonância magnética de curto prazo pode ser necessária, uma vez que a fixação do CPAW a um braço participante pode não ser possível em uma ressonância magnética de longa duração. Dito isto, adaptar o CPAW para uso em um pé ou perna é viável e seria compatível com uma configuração de furo longo. A titulação da temperatura do CPAW a uma temperatura altamente precisa também é difícil. Pesquisas indicam que desvios de até 2 °C estão associados a variações no tempo de tolerância e classificações de dor31. Para evitar isso, é aconselhável o uso de um freezer que possa ser resfriado a uma temperatura específica. Além disso, é aconselhável ter um segundo CPAW disponível se o dispositivo será empregado várias vezes em sucessão próxima (para evitar que ele seja aquecido além da temperatura desejada). Embora nos resultados representativos o uso do CPAW não tenha sido associado a aumentos no movimento da cabeça, os pesquisadores devem prestar especial atenção ao movimento da cabeça na configuração fMRI - especialmente se o CPAW estiver sendo aplicado durante (e não antes) da digitalização do FMRI. Enquanto as classificações subjetivas de estresse, a ativação do HPA e do SAM sugerem que o CPAW é um estressor eficaz comparável ao CPT tradicional, as pesquisas futuras devem se concentrar na comparação cuidadosa da extensão da atividade de HPA e SAM com a evocada pelo CPT tradicional, bem como outros índices fisiológicos (por exemplo, frequência cardíaca e pressão arterial).

A exposição ao estresse está associada à ativação de dois sistemas biológicos responsivos ao estresse: os eixos hipotalâmico-pituitário-adrenal (HPA) e o simpático-adrenomedullary (SAM)5. Quando o estresse é de intensidade suficiente para interromper o equilíbrio homeostático de um organismo, o SAM rapidamente desencadeia o aumento da atividade no ramo simpático do sistema nervoso autônomo (ANS). Isso está associado à liberação de catecolaminas (por exemplo, adrenalina e noradrenalina; CA) da medula adrenal e terminais nervosos simpáticos. O aumento dos níveis desses produtos químicos excitatórios está associado a elevações na frequência cardíaca e na pressão arterial que caracterizam a clássica resposta "luta ou fuga"6. Embora a ativação subsequente do ANS parassimpático eventualmente iniba essa excitação, neurônios ca ascendentes interligados com estruturas de tronco cerebral contribuem para uma ativação mais lenta do HPA através do hipotálamo e eventual glicocorticoide (ou seja, cortisol em humanos) liberados do córtex adrenal7. Compreender a relação entre a modalidade de estresse e a dinâmica específica da resposta ao estresse em si será fundamental à medida que a pesquisa sobre a relação entre o estresse e os correlatos neurais de vários processos psicológicos (por exemplo, memória, aprendizagem e tomada de decisão).
Múltiplas tarefas de indução de estresse foram desenvolvidas para uso em pesquisas laboratoriais. Geralmente, estes podem ser classificados como sistêmicos ( ouseja,representando uma resposta reflexiva a uma ameaça direta ao equilíbrio homeostático) ou processivo/psicogênico (ou seja, necessitando de processamento e avaliação do cérebro antes do engajamento da resposta ao estresse)8. Notavelmente, essas duas modalidades de estresse distintas Tarifa associada a padrões diferenciais de ativação de SAM e HPA. O teste de prensa fria (CPT) é um meio comum e bem validado de induzir estresse sistêmico envolvendo a imersão da mão dominante de um indivíduo na água gelada (tipicamente entre 0-5 °C) por um período de tempo4,9,10. A CPT tem sido utilizada em uma ampla gama de pesquisas que examinam a influência do estresse na memória11-13, aprendizagem14e tomada de decisão15-17. Estudos utilizando CPT como meio de indução de estresse têm, no entanto, rendido resultados mistos em termos de reatividade do cortisol. Os aumentos globais de cortisol leve a moderado foram observados após o CPT13,18,19,embora a ativação do SAM seja robusta e confiável4,20. Em contrapartida, estressores laboratoriais processivos como o Trier Social Stress Task (TSST)21,22, durante o qual os participantes dão um discurso de 5 min seguido por 5 min de aritmética mental enquanto são observados e/ou filmados, foram associados a aumentos de duas a três vezes no cortisol23.
Para maximizar a ativação do SAM e do HPA, alguns pesquisadores têm tomado a abordagem de combinar CPT com componentes avaliativos sociais semelhantes aos presentes no TSST. Por exemplo, no teste de prensa fria (SECPT) avaliado socialmente, os participantes são solicitados a realizar um CPT tradicional enquanto são gravados em vídeo e assistidos por um experimentador24. Da mesma forma, o Teste de Estresse Agudo de Maastricht integra o SECPT com componentes aritméticos em público e aritméticos mentais do TSST25. Embora essas abordagens representem um avanço significativo na pesquisa de estresse, é importante examinar a influência específica e potencialmente dissociável da ativação do SAM e do HPA sobre as correlações neurais de comportamento, cognição e emoção. Infelizmente, a CPT, envolvendo água, é muitas vezes impraticável de realizar em estudos envolvendo ressonância magnética (RM) a menos que concluída antes da entrada na própria ressonância magnética. Por exemplo, a água derramada pode ser uma ameaça para equipamentos de ressonância magnética sensíveis e caros (por exemplo, a bobina da cabeça) e pode interferir com o sinal de ressonância magnética devido à sua alta densidade de prótons26. Assim, à medida que são necessárias pesquisas envolvendo CPT para uso em contextos de neuroimagem, são necessárias modificações no procedimento tradicional da CPT. Para isso, propõe-se uma alternativa - o envoltório de braço de prensa fria (CPAW).
Em vez de imersão manual em água gelada, o CPAW envolve um envoltório de braço composto de gelpacs seguros para ressonância magnética resfriados a uma temperatura semelhante à CPT tradicional. Além disso, o CPAW é versátil em sua composição a partir de uma simples coleção de componentes comuns. É importante notar que existem preocupações adicionais de segurança no uso do CPAW, pois pode potencialmente ser resfriado a uma temperatura muito menor do que a água líquida. Dito isto, estes podem ser contabilizados com o mínimo esforço por parte do pesquisador. O armazenamento e o uso adequados do CPAW serão demonstrados com especial atenção aos protocolos de segurança.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:216px;">2 Cryo-Max Cold Packs (6 in x 12 in)</td>
			<td style="width:71px;">Modular Thermal Technologies</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:167px;">This is an example gelpac &#8211; others of a similar size would serve as well.</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Infrared Thermometer</td>
			<td style="width:71px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">02-401-1</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">Biopac MP150 Data Acquisition System</td>
			<td style="width:71px;">Biopac Systems, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">MP150</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">Biopac GSR EDA Galvanic Skin Response Amplifier</td>
			<td style="width:71px;">Biopac Systems, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">GSR100C</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">2 Biopac Unshielded Leads</td>
			<td style="width:71px;">Biopac Systems, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">LEAD110A</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">2 Biopac disposable Electrodermal Electrodes</td>
			<td style="width:71px;">Biopac Systems, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">EL507</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:216px;">Salivary Cortisol Enzyme Immunoassay Kit</td>
			<td style="width:71px;">Salimetrics, LLC.</td>
			<td style="width:119px;">I-3002</td>
			<td style="width:167px;">If assaying will not be conducted in-house, only collection supplies below are needed.</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Salimetrics Oral Swab</td>
			<td style="width:71px;">Salimetrics, LLC.</td>
			<td style="width:119px;">5001.02</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Swab Storage Tube</td>
			<td style="width:71px;">Salimetrics, LLC.</td>
			<td style="width:119px;">5001.05</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an alternative to the traditional cold pressor test: the cold pressor arm wrap

Recentemente, a pesquisa sobre a relação entre estresse e cognição, emoção e comportamento aumentou muito. Esses avanços têm gerado insights sobre questões importantes que vão desde a natureza da influência do estresse sobre o vício1 até o papel do estresse nas alterações neurais associadas a alterações na tomada de decisão2,3. Como os tópicos que estão sendo examinados pelo campo evoluem, também devem ser as metodologias envolvidas. Neste artigo é apresentada uma alternativa prática e eficaz a uma técnica clássica de indução de estresse, o teste de prensa fria (CPT): o envoltório de braço de prensa fria (CPAW). CPT normalmente envolve a imersão da mão dominante de um participante em água gelada por um período de tempo4. A técnica está associada à ativação robusta do eixo simpatizante-adrenomedullary (SAM) (e liberação de catecolaminas; por exemplo, adrenalina e noradrenalina) e ativação leve a moderada do eixo hipotalâmico-pituitário-adrenal (HPA) com liberação de glicocorticoide associado(por exemplo, cortisol). Embora a CPT tenha sido usada em uma ampla gama de estudos, pode ser impraticável aplicar em alguns ambientes de pesquisa. Por exemplo, o uso de água durante, em vez de antes, da ressonância magnética (RM) tem o potencial de danificar equipamentos sensíveis e caros ou interferir na aquisição de sinal de ressonância magnética. O CPAW é uma alternativa prática e eficaz ao CPT tradicional. Composto por uma lista versátil de componentes baratos e facilmente adquiridos, o CPAW faz uso de gelpacs seguros para ressonância magnética refrigerados a uma temperatura semelhante à CPT em vez de água real. É importante ressaltar que o CPAW está associado a níveis de ativação de SAM e HPA comparáveis ao CPT, e pode ser facilmente aplicado em uma variedade de contextos de pesquisa. Embora seja importante manter protocolos de segurança específicos ao usar a técnica, estes são fáceis de implementar se planejados. Será discutida a criação e o uso do CPAW.

O CPAW foi usado em um estudo publicado anteriormente examinando a influência do estresse agudo no processamento de recompensa neural enquanto os participantes foram submetidos à ressonância magnética funcional27. Trinta e dois participantes (16 mulheres, 16 homens; idade média = 23,41 anos, anos de DP = 4,07) foram aleatoriamente atribuídos entre os sujeitos a um CPAW ou nenhum grupo de controle de estresse (um envoltório de braço composto por toalhas à temperatura ambiente). Uma amostra de cortisol salivar de base foi adquirida no início do protocolo seguida pela aplicação cpaw (ou sem controle de estresse) por 2 min, após a qual uma tarefa comportamental de 10 minutos foi realizada. Após a primeira tarefa comportamental, esse padrão se repetiu - uma segunda amostra de saliva foi adquirida, seguida por CPAW (ou sem controle de estresse) por 2 min, e uma segunda tarefa comportamental de 10 minutos. Uma terceira amostra de saliva foi adquirida após a segunda tarefa comportamental. Em um questionário pós-experimental, os participantes foram convidados a relatar classificações subjetivas de estresse percebido, incluindo como o envoltório do braço os fez sentir (bom a ruim) e quão estressante a experiência foi (alta a baixa) em uma escala likert de 7 pontos.
Em comparação com o grupo sem estresse, os participantes que experimentaram o CPAW relataram o envoltório do braço como se sentindo significativamente mais estressante, t(30) = 3,46, p< 0,01, d = 1,22, e como se sentindo significativamente pior, t(30) = 4,42, p< 0,001, d = 1,56. Três participantes foram excluídos da análise de cortisol salivar, um devido a amostras corrompidas e dois devido à incapacidade de coletar amostras durante o experimento. Assim, foram realizadas análises finais de cortisol em 29 dos 32 participantes (13 sem controle de estresse, 16 CPAW). A área sob a curva com relação ao aumento (AUCI)foi calculada utilizando-se o método trapezoidal para ambos os grupos (ver Tabela 1 para cortisol salivar médio de cada amostra por grupo experimental em nmol/L)28. Um teste t independente de uma cauda entre o não controle de estresse e o grupo CPAW AUCI indicou um aumento significativo no cortisol salivar para o grupo CPAW, t(27) = 1,78, p< 0,05, d = 0,69 (Ver Figura 1). Apenas dois participantes apresentaram movimento de cabeça superior a um voxel (ou seja,3 mm), mas ambos estavam no grupo sem estresse. Nenhum participante retirou-se do estudo devido à exposição do CPAW. A análise preliminar de um conjunto de dados adicional fornece suporte convergente para a eficácia do CPAW em termos de ativação do SAM (ou seja, condução da pele)29. Vinte e oito participantes (14 mulheres, 14 homens; idade média = 21,18 anos, anos de DP = 2,97) realizaram um envoltório de braço sem controle de estresse (acima) por 2 minutos seguido de uma tarefa comportamental de 15 minutos. Depois disso, eles realizaram o CPAW por 2 minutos, seguidos por uma segunda tarefa comportamental de 15 min (todos dentro dos sujeitos). Os níveis de condutância da pele (SCL) foram medidos durante cada uma das exposições de envoltório do braço (sem controle de estresse e CPAW) usando um módulo BIOPAC e analisados usando o software AcqKnowledge. A forma média de onda SCL de cada envoltório de braço de 2 min foi calculada (em microsiemens, μs) e normalizada usando uma transformação de raiz quadrada30. Um teste t emparelhado indicou SCL significativamente elevado durante a exposição do CPAW acima do controle de estresse, t(27) = 5,49, p< .001, d = .65 (ver Figura 2).
<img alt="Table 1" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/50849/50849table1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50849/50849table1.jpg" width="500px"> Mesa 1. Níveis médios de cortisol salivar em nmol/L na linha de base, após a tarefa de executar 1, e após a tarefa executar 2 para CPAW e nenhum grupo de controle de estresse (Mean ± SEM). Adaptado de Porcelli et al. 27 com permissão. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50849/50849table1highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver imagem maior</a>. 
<img alt="Figure 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50849/50849fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50849/50849fig1.jpg" width="500px"> Figura 1. Área de cortisol salivar sob a curva em relação ao aumento (AUCI) para CPAW e sem grupos de controle de estresse. Os valores negativos de AUCI, que indicam uma diminuição líquida do cortisol salivar, foram mantidos como "índice de queda"28. Adaptado de Porcelli et al. 27 com permissão. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50849/50849fig1highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver imagem maior</a>.
<img alt="Figure 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50849/50849fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50849/50849fig2.jpg" width="500px"> Figura 2. Níveis médios de condutância da pele (em microsiemens; μs) durante o CPAW ou sem envoltório de braço de controle de estresse. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50849/50849fig2highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver imagem maior</a>.

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An Alternative to the Traditional Cold Pressor Test: The Cold Pressor Arm Wrap

O teste de prensa fria é uma tarefa clássica de indução de estresse usada em uma ampla gama de pesquisas que examinam a relação entre estresse e cognição, emoção e comportamento. Neste artigo, é apresentada uma alternativa prática e versátil ao teste tradicional de prensa fria: o envoltório de braço de prensa fria.

Uma alternativa ao teste tradicional de prensa fria: o envoltório do braço da prensa fria

Recently research on the relationship between stress and cognition, emotion, and behavior has greatly increased. These advances have yielded insights into ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

14.3K visualizações.  Marquette University. O teste de prensa fria é uma tarefa clássica de indução de estresse usada em uma ampla gama de pesquisas que examinam a relação entre estresse e cognição, emoção e comportamento. Neste artigo, é apresentada uma alternativa prática e versátil ao teste tradicional de prensa fria: o envoltório de braço de prensa fria.

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Use of an Eight-arm Radial Water Maze to Assess Working and Reference Memory Following Neonatal Brain Injury

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food deprivation, and may introduce scent cue confounds. The eight-arm radial water maze is designed to evaluate reference and working memory performance simultaneously by requiring subjects to use extra-maze cues to locate escape platforms and remedies the limitations observed in land based radial arm maze designs. Specifically, subjects are required to avoid the arms previously used for escape during each testing day (working memory) as well as avoid the fixed arms, which never contain escape platforms (reference memory). Re-entries into arms that have already been used for escape during a testing session (and thus the escape platform has been removed) and re-entries into reference memory arms are indicative of working memory deficits. Alternatively, first entries into reference memory arms are indicative of reference memory deficits. We used this maze to compare performance of rats with neonatal brain injury and sham controls following induction of hypoxia-ischemia and show significant deficits in both working and reference memory after eleven days of testing. This protocol could be easily modified to examine many other models of learning impairment.

The eight-arm radial water maze is designed to evaluate reference and working memory performance simultaneously by requiring subjects to use extra-maze cues to locate escape platforms and remedies the limitations observed in land based radial arm maze designs.

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food ...

Comportamento

Assessment of Murine Exercise Endurance Without the Use of a Shock Grid: An Alternative to Forced Exercise

Using laboratory mouse models, the molecular pathways responsible for the metabolic benefits of endurance exercise are beginning to be defined. The most common method for assessing exercise endurance in mice utilizes forced running on a motorized treadmill equipped with a shock grid. Animals who quit running are pushed by the moving treadmill belt onto a grid that delivers an electric foot shock; to escape the negative stimulus, the mice return to running on the belt. However, avoidance behavior and psychological stress due to use of a shock apparatus can interfere with quantitation of running endurance, as well as confound measurements of postexercise serum hormone and cytokine levels. Here, we demonstrate and validate a refined method to measure running endurance in na&#239;ve C57BL/6 laboratory mice on a motorized treadmill without utilizing a shock grid. When mice are preacclimated to the treadmill, they run voluntarily with gait speeds specific to each mouse. Use of the shock grid is replaced by gentle encouragement by a human operator using a tongue depressor, coupled with sensitivity to the voluntary willingness to run on the part of the mouse. Clear endpoints for quantifying running time-to-exhaustion for each mouse are defined and reflected in behavioral signs of exhaustion such as splayed posture and labored breathing. This method is a humane refinement which also decreases the confounding effects of stress on experimental parameters.

A method to assess exercise endurance in laboratory mice without the use of a shock grid is demonstrated. This method is a humane refinement that can decrease the confounding effects of stress on experimental parameters.

Avaliação da Murino exercício de resistência sem o uso de um choque grade: uma alternativa para o exercício forçado

Using laboratory mouse models, the molecular pathways responsible for the metabolic benefits of endurance exercise are beginning to be defined. The most ...

The 4 Mountains Test: A Short Test of Spatial Memory with High Sensitivity for the Diagnosis of Pre-dementia Alzheimer's Disease

This protocol describes the administration of the 4 Mountains Test (4MT), a short test of spatial memory, in which memory for the topographical layout of four mountains within a computer-generated landscape is tested using a delayed match-to-sample paradigm. Allocentric spatial memory is assessed by altering the viewpoint, colors and textures between the initially presented and target images.
Allocentric spatial memory is a key function of the hippocampus, one of the earliest brain regions to be affected in Alzheimer&#39;s disease (AD) and impairment of hippocampal function predates the onset of dementia. It was hypothesized that performance on the 4MT would aid the diagnosis of predementia AD, which manifests clinically as Mild Cognitive Impairment (MCI).
The 4MT was applied to patients with MCI, stratified further based on cerebrospinal fluid (CSF) AD biomarker status (10 MCI biomarker positive, 9 MCI biomarker negative), and with mild AD dementia, as well as healthy controls. Comparator tests included tests of episodic memory and attention widely accepted as sensitive measures of early AD. Behavioral data were correlated with quantitative MRI measures of the hippocampus, precuneus and posterior cingulate gyrus.
4MT scores were significantly different between the two MCI groups (p = 0.001), with a test score of &#8804;8/15 associated with 100% sensitivity and 78% specificity for the classification of MCI with positive AD biomarkers, i.e., predementia AD. 4MT test scores correlated with hippocampal volume (r = 0.42) and cortical thickness of the precuneus (r = 0.55).
In conclusion, the 4MT is effective in identifying the early stages of AD. The short duration, easy application and scoring, and favorable psychometric properties of the 4MT fulfil the need for a simple but accurate diagnostic test for predementia AD.

The 4 Mountains Test: A Short Test of Spatial Memory with High Sensitivity for the Diagnosis of Pre-dementia Alzheimer&#039;s Disease

This article describes the 4 Mountains Test (4MT), a hippocampus-dependent test of working allocentric spatial memory. The hippocampus is affected early in Alzheimer's disease (AD) and this article outlines the 4MT methodology and results of patient testing, which demonstrates the value of the 4MT in the diagnosis of pre-dementia AD.

A 4 Montanhas de teste: um teste curto de memória espacial com alta sensibilidade para o diagnóstico de pré-demência da doença de Alzheimer

This protocol describes the administration of the 4 Mountains Test (4MT), a short test of spatial memory, in which memory for the topographical layout of ...

The Other End of the Leash: An Experimental Test to Analyze How Owners Interact with Their Pet Dogs

It has been suggested that the way in which owners interact with their dogs can largely vary and influence the dog-owner bond, but very few objective studies, so far, have addressed how the owner interacts with the dog. The goal of the present study was to record dog owners&#39; interaction styles by means of objective observation and coding. The experiment included eight standardized situations in which owners of pet dogs were asked to perform specific tasks including both positive (i.e. playing, teaching a new task, showing a preference towards an object in a food searching task, greeting after separation) and potentially distressing tasks (i.e. physical restriction during DNA sampling, putting a T-shirt onto the dog, giving basic obedience commands while the dog was distracted). The video recordings were coded off-line using a specifically designed coding scheme including scores for communication, social support, warmth, enthusiasm, and play style, as well as frequency of behaviors like petting, praising, commands, and attention sounds. Exploratory Factor Analysis of the 20 variables measured revealed 3 factors, labeled as Owner Warmth, Owner Social Support, and Owner Control, which can be viewed as analogues to parenting style dimensions. The experimental procedure introduced here represents the first standardized measure of interaction styles of dog owners. The methodology presented here is a useful tool to investigate individual variation in the interaction style of pet dog owners that can be used to explain differences in the dog-human relationship, dogs&#39; behavioral outcomes, and dogs stress coping strategies, all crucial elements both from a theoretical and applied point of view.

This article presents eight different experimental tasks, mirroring the everyday life of dogs and owners, used to analyze how owners interact with their dogs in a standardized way. The tasks included both positive (e.g. play) and negative (potentially stressful) situations (e.g. physical restriction).

A outra extremidade da correia: um teste Experimental para analisar como proprietários interagem com seus cães de estimação

It has been suggested that the way in which owners interact with their dogs can largely vary and influence the dog-owner bond, but very few objective ...

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral science, conflicting outcomes are often provided from different laboratories. To identify reasons for the different outcomes, we previously focused on arm features, which differ between laboratories, most notably the presence/absence of ledges at the sides of open arms and the transparency/opaqueness of closed arm walls. In a previous report, we used a custom designed container to compare rat behavior on different combinations of open and closed arm designs under otherwise identical experimental conditions, and showed that differences in arm features interfere with experimental outcomes. In brief, open arm ledges significantly increased anxiety-like behavior in rats, while transparent arms may also have decreased this behavior. Furthermore, we verified a higher detection sensitivity of the effect of an anxiolytic drug in a combination of no-ledged open arm + opaque walled closed arm compared with a combination of ledged open arm + transparent walled closed arm. In this report, we introduce our protocol for the elevated plus maze test, together with discussion of the key results from the previous report and our experimental experience. We believe this report will provide useful information for researchers who have employed or who plan to use the elevated plus maze in their studies.

Rats' anxiety-like behavior tested by the elevated plus maze varies highly depending on the testing environment. Here we show how apparatus settings, especially arm structure, affect behavior on the maze, and we explain a reliable protocol to detect effects of anxiolytic drugs. This report will contribute to anxiety research.

Testes Animal ansiedade em ratos: efeitos de bordas de braço aberto e fechado do braço de parede transparência em elevados além de teste de labirinto

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

An Objective and Child-friendly Assessment of Arm Function by Using a 3-D Sensor

Progressive and irreversible muscle atrophy characterizes Spinal Muscular Atrophy (SMA) and other similar muscle disorder diseases. Objective assessment of muscle functions is an essential and important, although challenging, prerequisite for successful clinical trials. Current clinical rating scales restrain the movement abnormalities to certain predefined coarse-grained individual items. The Kinect 3-D sensor has emerged as a low-cost and portable motion sensing technology used to capture and track people&#39;s movement in many medical and research fields. A novel approach using this 3-D sensor was developed and a game-like test was designed to objectively measure the upper limb function of patients with SMA. The prototype test targeted joint movement capability. While sitting in a virtual scene, the patient was instructed to extend, flex, and lift the whole arm in order to reach and place some objects. Both kinematic and spatiotemporal characteristics of upper limb movement were extracted and analyzed, e.g., elbow extension and flexion angles, hand velocity, and acceleration. The first study included a small cohort of 18 ambulant SMA patients and 19 age- and gender-matched healthy controls. A comprehensive analysis of arm movement was achieved; however, no significant difference between the groups were found due to the mismatch of patient&#39;s capability and the test difficulty. Based on this experience, a second version of the test consisting of a modified version of the first game with increased difficulties and a second game targeting muscle endurance were designed and implemented. The new test has not been conducted in any patient groups yet. Our work has demonstrated the potential capability of the 3-D sensor in assessing such muscle function and suggested an objective approach to complement the clinical rating scales.

An objective measure of muscle functions is challenging especially in children. Based on a commercially available digital 3-D sensor, a child-friendly gaming test was developed to assess upper limb function for clinical trials.

Uma avaliação objetiva e criança-amigável da função do braço usando um Sensor 3D

Progressive and irreversible muscle atrophy characterizes Spinal Muscular Atrophy (SMA) and other similar muscle disorder diseases. Objective assessment ...

Evaluating the Anti-depression Effect of Xiaoyaosan on Chronically-stressed Mice

In addition to the standardized use of antidepressant medications and psychotherapy, the usage of traditional Chinese medicine has lead to an overall improvement of patients with major depressive disorder (MDD). Therefore, the purpose of this study was to establish the mouse depressive model, observe the behavior changes associated with chronic unpredictable mild stress (CUMS), and then evaluate the anti-depression effect of Xiaoyaosan. Mice were randomly divided into four groups: a control group, a model group, a treatment group with Xiaoyaosan, and a treatment group with fluoxetine. All mice were individually kept in cages, and depression was induced in the mice by exposing them to several designed manipulations of CUMS for 21 days, as described in the protocol. Mice in the control group and model group received 0.5 mL of distilled water, while mice in the treatment groups received either Xiaoyaosan (0.25 g/kg/day) or fluoxetine (2.6 mg/kg/day). The drugs used in the study were given intragastrically daily during the entire three weeks. To estimate the depressive-like behaviors, a series of parameters including the coat state, body weight, open field test score, and sucrose preference test score were recorded. Data analysis showed that behaviors of model mice were significantly changed compared to behaviors of mice in the control group, which were improved by the treatment of Xiaoyaosan and fluoxetine. The current findings demonstrated the anti-depression effects of Xiaoyaosan on the behaviors of CUMS-induced mice and revealed that compounds from the Xiaoyaosan prescription may be worthwhile for treating depression, considering their beneficial effects on depressive-like behaviors.

Here, we present a protocol to establish the mouse depressive model, observe the behavior changes associated with chronic unpredictable mild stress (CUMS), and evaluate the anti-depression effect of Xiaoyaosan.

Avaliação do efeito antidepressão de Xiaoyaosan em ratos cronicamente estressado

In addition to the standardized use of antidepressant medications and psychotherapy, the usage of traditional Chinese medicine has lead to an overall ...

An Instrumented Pull Test to Characterize Postural Responses

Impairment of postural reflexes, termed postural instability, is a common and disabling deficit in Parkinson's disease. To assess postural reflexes, clinicians typically employ the pull test to grade corrective responses to a backward perturbation at the shoulders. However, the pull test is prone to issues with reliability and scaling (score/4). Here, we present an instrumented version of the pull test to more precisely quantify postural responses. Akin to the clinical test, pulls are manually administered except pull force is also recorded. Displacements of the trunk and feet are captured by a semi-portable motion tracking system. Raw data represent distance traveled (in millimeter units), making subsequent interpretation and analysis intuitive. The instrumented pull test also detects variabilities influencing pull test administration, such as pull force, thereby identifying and quantifying potential confounds that can be accounted for by statistical techniques. The instrumented pull test could have application in studies seeking to capture early abnormalities in postural responses, track postural instability over time, and detect responses to therapy.

Impairment of postural reflexes, termed postural instability, is difficult to quantify. Clinical assessments such as the pull test suffer issues with reliability and scaling. Here, we present an instrumented version of the pull test to objectively characterize postural responses.

Um teste de tração instrumentado para caracterizar respostas posturais

Impairment of postural reflexes, termed postural instability, is a common and disabling deficit in Parkinson's disease. To assess postural reflexes, ...

The Use of Traditional Fear Tests to Evaluate Different Emotional Circuits in Cattle

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli may facilitate breeding selections and identify animals that are better suited to specific management strategies. Multiple tests have been developed to evaluate cattle temperament (e.g., exit velocity, chute score, pen score, open field test, startle test, bovine zero maze), but each of these tests evaluates the animal&#39;s response to different stimuli (e.g., isolation, novel environment, startle, willingness to enter an enclosed area). Cattle temperament has been observed to be relatively stable over time. However, the evaluation of temperament has the potential to be influenced by current conditions, previous experiences, and observer bias. Many of these temperament tests have been improperly categorized as fear tests and have also been criticized for being subjective. This paper provides a framework for standardizing behavioral tests for cattle and suggests that these different evaluations assess different aspects of the animal&#39;s overall temperament.

Here, we present a protocol to conduct a variety of behavioral tests in cattle that have been designed to evaluate emotions. A battery of behavioral tests (open field test, startle test, bovine zero maze, exit velocity, pen score, and chute score) were conducted to evaluate different components of animal temperament.

O uso de testes tradicionais de medo para avaliar diferentes circuitos emocionais em bovinos

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli ...

Validando um modelo murino da síndrome de Angelman usando testes comportamentais

Behavioral Characterization of an Angelman Syndrome Mouse Model

This manuscript describes a battery of behavioral tests available to characterize Angelman syndrome (AS)-like phenotypes in an established murine model of AS. We use the rotarod learning paradigm, detailed gait analysis, and nest building test to detect and characterize animal motor impairments. We test animal emotionality in the open field and elevated plus maze tests, as well as the affect in the tail suspension test. When AS mice are tested in the open field test, the results should be interpreted with care, since motor dysfunctions influence mouse behavior in the maze and alter activity scores.
The reproducibility and effectiveness of the presented behavioral tests has already been validated in several independent Uba3a mouse lines with different knockout variants, establishing this set of tests as an excellent validation tool in AS research. Models with the relevant construct and face validity will warrant further investigations to elucidate the pathophysiology of the disease and grant the development of causal treatments.

Autor em destaque: uma bateria de testes comportamentais altamente reproduzíveis para validar um modelo murino da síndrome de Angelman 

This manuscript presents a set of highly reproducible behavioral tests to validate an Angelman syndrome mouse model.

Caracterização comportamental de um modelo de camundongo com síndrome de Angelman

This manuscript describes a battery of behavioral tests available to characterize Angelman syndrome (AS)-like phenotypes in an established murine model of ...