The authors acknowledge the work that was done by the first author of the IoN-CCI model, Bart Vos&#8224;.

Declaração de ética: Os animais são tratados e cuidados de acordo com as orientações do Comité de Investigação e Questões Éticas da IASP 11. O protocolo foi aprovado pelo Comitê de Ética institucional. 1. Temas <ol><li> Utilizar ratos machos Sprague-Dawley (250-300 g, à chegada). </li><li> Casa ratos nas gaiolas de fundo sólido em uma sala de colônia com uma umidade de 40-60% e um IR de 21 ± 1 ° C. </li><li> Faça água e alimentos disponíveis no libitum. </li><li> Mantenha ratos sob uma invertida 00:12 hr escuro / ciclo de luz (luzes acesas às 20 h). </li></ol> 2. Cirurgia <ol><li> Por rato, preparar duas partes de ligadura intestino crómico (5-0) de aproximadamente 6 cm de comprimento e colocá-los em solução salina estéril para evitar a secagem e a tornar-se rígida e quebradiça. </li><li> Anestesiar os animais com pentobarbital (60 mg / kg, ip) e trata-se com atropina (0,1 mg / kg, ip). Monitorar o nível de anestesia, estendendo uma perna e pinching a teia de pele entre os dedos com uma unha para garantir a pressão adequada é aplicada. Certifique-se de que o animal não flexionar seu membro. Se necessário, administrar pentobarbital adicional. </li><li> Raspar a cabeça do rato de modo que uma linha média do couro cabeludo incisão pode ser feita de, aproximadamente, 25 mm, com distâncias iguais anterior e posterior para o centro dos olhos. </li><li> Fixe a cabeça do rato em um quadro estereotáxico ou não fixar a cabeça do rato. Colocar o rato em uma almofada aquecida para manter a temperatura corporal. </li><li> Aplicar pomada oftálmica em ambos os olhos para evitar danos causados ​​por secagem. </li><li> Esfregue a área cabeça raspada com álcool, em seguida, betadine. </li><li> Faça uma linha média do couro cabeludo incisão, expondo o crânio e do osso nasal. </li><li> Use um microscópio de operação para executar passos 2,9-2,16. </li><li> Dissecar a borda da órbita livre, formado pelo maxilar, frontal, lacrimal e ossos zigomática, utilizando um cotonete e um par de fórceps Dumont. Use o cotonete para assimak-se sangue de possíveis sangramentos. </li><li> Para dar acesso à ION, desviar suavemente o conteúdo orbital com um cotonete de algodão de precisão, tomando cuidado para não esticar o nervo etmoidal anterior, que atravessa superior ao íon. Dissecar o íon livre do tecido conjuntivo circundante, usando um cotonete precisão e um par de fórceps Dumont usando um movimento de propagação. Use o cotonete para absorver o sangue de possíveis sangramentos. </li><li> Para realizar uma ligação, empurrar uma extremidade de um único pedaço de intestino crômico para baixo ao longo do osso frontal, medial à ION e avançar alguns milímetros paralelo e inferior ao do íon. A ligadura é agora realizada no local entre o íon e do osso frontal. </li><li> Deslize a ponta de uma de 45 graus fórceps Dumont em ângulo sob o íon para colocá-lo em estreita proximidade com a ligadura. Suavemente retrair o ION lateralmente para revelar a ligadura e ponta da pinça. Segure a ligadura com a pinça e retirar a pinça lateralmente debaixo da ION. </li&gt; <li> Puxe a ligadura da cavidade orbital até que ambas as extremidades da ligadura são mais ou menos equidistantes da ION. </li><li> Faça um &quot;nó corrediço&quot; a partir das duas extremidades da ligadura para permitir o controle perfeito sobre o grau de constrição e deslize o nó contra o ION. Deslize o nó adicional para contrair o Ion de modo que o diâmetro do nervo é reduzido por uma quantidade apenas perceptível. Adicione um nó normais no topo do nó de deslizamento de modo a que a quantidade de constrição permanece constante (isto é, para impedir que o nó de deslizamento fenda). </li><li> Corte as ligaduras de deixar cerca de 2 mm de extremidades livres a partir do nó. </li><li> Repita o mesmo procedimento (etapas 2,11-2,15) para fazer uma segunda ligadura 2 de distância do primeiro. </li><li> Para a cirurgia sham, execute os passos 2,2-2,10. </li><li> Fechar a incisão no couro cabeludo utilizando suturas de poliéster (4-0) e permitir que o rato para recuperar numa almofada aquecida. Não deixe o animal sem supervisão até que ele recuperou contras suficientesciousness para manter decúbito esternal e não devolver o animal para a companhia de outros animais até que esteja totalmente recuperado. </li><li> Para evitar efeitos analgésicos de preferência sobre o desenvolvimento da dor neuropática, não administrar analgesia para dor pós-cirúrgica. </li></ol> 3. Procedimento de Teste Comportamental <ol><li> Permitir ratos para se aclimatar por pelo menos 8 dias para as condições de habitação antes do teste pré-operatório. </li><li> Habituar ratos para o procedimento de teste pelo menos uma vez por dia durante três dias antes do teste pré-operatório. </li><li> Conduta testes numa sala escura, com luz fornecida por uma luz vermelha de 60 W suspensa lâmpada 1 m acima do centro da área de teste de iluminação do centro, mas deixando a circunferência fraca e o resto da sala escura. </li><li> Verifique se há ruído de fundo suficiente para diminuir a interferência de estimulação auditiva súbita. Se necessário, forneça ruído branco. </li><li> Observação de comportamento de limpeza rosto <ol><li> TRANSPORTES um único rato da colônia para a sala de teste em uma gaiola de plástico coberto, sem roupa de cama. Nota: O ideal é que esta deve ser uma curta viagem com estímulos externos mínimas. </li><li> Coloque o rato em uma coberta, gaiola de plástico transparente, sem roupa de cama (cxlxa: 24 cm x 14 cm x 17 cm) com um backup espelhado na frente de uma câmera de vídeo. </li><li> Adicione uma gravação de 10 minutos o comportamento do animal. Durante a gravação, verifique se o experimentador não está presente na sala de prova. </li><li> Limpar a gaiola de observação antes de colocar o próximo animal. </li><li> Certifique-se o comportamento registrado é analisada por um experimentador que é cego à condição experimental do rato. </li><li> Faça um registro de cada episódio rosto aliciamento durante os 10 min de gravação. Nota: aliciamento de rosto está definido como padrões de movimento em que as patas dianteiras são trazidos em contato com áreas faciais. </li><li> Faça uma distinção entre dois tipos de comportamento rosto grooming. Se uma sequência não é antecedida nem seguida decorpo aliciamento (ou seja, a preparação de uma área do corpo que não seja a face), classificar o episódio como isolado rosto grooming. Se aliciamento corpo é realizada imediatamente antes ou após rosto grooming, classificar o episódio como aliciamento rosto durante a preparação do corpo. </li><li> Determinar o número de episódios rosto grooming. <ol><li> Categorizar um período de tempo entre as acções cara aliciamento que não exceda 4 s como um espaço intra-episódio (ou seja, uma pausa entre as acções cara aliciamento dentro de um único episódio). </li><li> Categorizar um período de tempo entre preparação ações cara que exceda 4 s como um espaço inter-episódio (ou seja, uma interrupção completa de ações cara preparação entre dois episódios). </li></ol></li></ol></li><li> Testes de estimulação mecânica <ol><li> Ratos de transporte em grupos de até 6 animais da colónia para a sala de teste em uma gaiola coberta com roupa de cama. Certifique-se de que esta é uma viagem curta com estímulos externos mínimas. </li><li> Coloque oratos individualmente em gaiolas de plástico transparente com roupa de cama (CxLxA: 24 cm x 14 cm x 17 cm) com uma tampa articulada de modo que possa ser facilmente aberta e fechada. </li><li> Usar uma série graduada de cinco filamentos de von Frey. Nota: A força necessária para dobrar os cabelos é de 0,015 g, 0,127 g, 0,217 g, 0,745 g e 2.150 g. </li><li> Habituam os ratos para a gaiola de observação e movimentos que alcançam para 10 min. A cada 30 seg, abrir a tampa e suavemente tocar a parede da gaiola com uma vareta de plástico. </li><li> Quando o animal está em um sniffing / nenhum estado locomoção (ou seja, com quatro patas colocado no chão, nem em movimento nem congelação, mas exibindo sniffing comportamento), aplique a primeira cabelos von Frey no território Ion perto do centro da almofada de vibrissas , na pele peluda torno do vibrissas mystacial. </li><li> Conseguir a resposta do animal ao estímulo de pertencer a uma das seguintes categorias de resposta 4. <ol><li> Categorizar uma completa falta de resposta comoescore 0. </li><li> Categorizar um estímulo detecção (ou seja, o rato vira a cabeça em direção ao objeto estimulante eo objeto estímulo é, então, explorada) como uma pontuação. </li><li> Categorizar uma reação de retirada (ie., O rato vira a cabeça lentamente ou puxa-o rapidamente para trás quando o estímulo é aplicado, por vezes, um único rosto limpe ipsilateral à área estimulada ocorre) como marcador em 2. </li><li> Categorizar um escape / resposta ataque (ie., O rato evita ainda mais contato com o objeto de estímulo, de forma passiva, movendo seu corpo para longe do objeto estimular a assumir uma posição de agachamento contra a parede da jaula, ou ativamente, atacando o objeto estímulo, tornando- mordendo e agarrando movimentos) como marcador em 3. </li><li> Categorizar rosto assimétrico aliciamento (ou seja, o rato exibe uma série ininterrupta de pelo menos três acidentes vasculares cerebrais face-lavagem voltadas para a área facial estimulada) como nota 4. </li><li> Dentro de cada animal, aplicar Stimuli em uma ordem crescente de intensidade. Depois de uma intensidade do estímulo foi aplicado para um lado, aplicá-lo para o outro lado antes de passar para a próxima intensidade do estímulo. Aleatória a ordem em que os lados ipsilateral e contralateral são estimulados. Note-se que o animal deve estar em um sniffing / nenhum estado locomoção antes de cada estimulação. </li></ol></li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Jensen, T. S., Gottrup, H., Sindrup, S. H., Bach, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+clinical+picture+of+neuropathic+pain.">The clinical picture of neuropathic pain.</a> Eur J Pharmacol. 429 (1-3), 1-11 (2001).</li><li>Meyer Rosberg, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+a+multidimensional+burden+for+patients.">Neuropathic pain a multidimensional burden for patients.</a> Eur J Pain. 5 (4), 379-389 (2001).</li><li>Meyer Rosberg, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+SF+36+and+Nottingham+Health+Profile+in+patients+with+chronic+neuropathic+pain.">Comparison of the SF 36 and Nottingham Health Profile in patients with chronic neuropathic pain.</a> Eur J Pain. 5 (4), 391-403 (2001).</li><li>Vos, B. 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F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+between+two+types+of+behavioral+variables+of+non+evoked+facial+pain+after+chronic+constriction+injury+to+the+rat+infraorbital+nerve.">Comparison between two types of behavioral variables of non evoked facial pain after chronic constriction injury to the rat infraorbital nerve.</a> Comp Med. 52 (1), 44-49 (2002).</li><li>Deseure, K., Adriaensen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonevoked+facial+pain+in+rats+following+infraorbital+nerve+injury+a+parametric+analysis.">Nonevoked facial pain in rats following infraorbital nerve injury a parametric analysis.</a> Physiol Behav. 81 (4), 595-604 (2004).</li><li>Deseure, K., Hans, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+study+of+non+evoked+orofacial+pain+following+different+types+of+infraorbital+nerve+injury+in+rats.">Behavioral study of non evoked orofacial pain following different types of infraorbital nerve injury in rats.</a> Physiol Behav. 138, 292-296 (2015).</li><li>Deseure, K., Koek, W., Adriaensen, H., Colpaert, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+administration+of+the+5+hydroxytryptamine1A+agonist+(3-Chloro-4-fluoro-phenyl)-[4-fluoro-4-[[(5-methyl-pyridin-2-ylmethyl)+-amino]-methyl]piperidin-1-yl]-methadone+(F+13640)+attenuates+allodynia+like+behavior+in+a+rat+model+of+trigeminal+neuropathic+pain.">Continuous administration of the 5 hydroxytryptamine1A agonist (3-Chloro-4-fluoro-phenyl)-[4-fluoro-4-[[(5-methyl-pyridin-2-ylmethyl) -amino]-methyl]piperidin-1-yl]-methadone (F 13640) attenuates allodynia like behavior in a rat model of trigeminal neuropathic pain.</a> J Pharmacol Exp Ther. 306 (2), 505-514 (2003).</li><li>Zimmerman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethical+Guidelines+for+investigations+of+experimental+pain+in+conscious+animals.">Ethical Guidelines for investigations of experimental pain in conscious animals.</a> Pain. 16, 109-110 (1983).</li><li>Mogil, J. S., Crager, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+should+we+be+measuring+in+behavioral+studies+of+chronic+pain+in+animals.">What should we be measuring in behavioral studies of chronic pain in animals.</a> Pain. 112 (1-2), 12-15 (2004).</li><li>Backonja, M. M., Stacey, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+symptoms+relative+to+overall+pain+rating.">Neuropathic pain symptoms relative to overall pain rating.</a> J Pain. 5 (9), 491-497 (2004).</li><li>Imamura, Y., Kawamoto, H., Nakanishi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+heat+hyperalgesia+in+an+experimental+trigeminal+neuropathy+in+rats.">Characterization of heat hyperalgesia in an experimental trigeminal neuropathy in rats.</a> Exp Brain Res. 116, 97-103 (1997).</li><li>Chichorro, J. G., Zampronio, A. R., Souza, G. E., Rae, G. 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L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+bilateral+trigeminal+constriction+injury+using+an+operant+facial+pain+assay.">Characterization of bilateral trigeminal constriction injury using an operant facial pain assay.</a> Neuroscience. 224, 294-306 (2012).</li><li>Anderson, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+Operant+Orofacial+Pain+Assessment+Device+(OPAD)+to+Measure+Changes+in+Nociceptive+Behavior.">Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior.</a> J Vis Exp. (76), 50336 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

O aspecto mais interessante do modelo de íon-CCI é que ele fornece uma medida única de (neuropática) dor espontânea, não evocado. A maioria dos estudos com animais de dor neuropática, utilizando modelos do nervo espinhal, abordar exclusivamente comportamentos nocifensive (por exemplo., Vocalização e respostas de retirada), reflectindo a hipersensibilidade a estímulos mecânicos ou térmicos 12. No entanto, a queixa clínica principal em pacientes é dor em curso, não hiperalgesia ou alodin...

A lesão dos nervos somatossensoriais na maioria das vezes conduz à perda de sensibilidade. Ele não é muito bem compreendido por que e como, em alguns casos, danos nos nervos periféricos leva à dor crônica. Como resultado, neuropatias dolorosas continuam a ser um desafio para tratar a condição 1 e resultam em reduções substanciais na qualidade de vida dos pacientes 2-3. Os modelos animais são uma ferramenta importante para examinar a eficácia dos medicamentos existentes e recentemente desenvolvidas e identificar os mecanismos fisiopatológicos envolvidos no desenvolvimento e manutenção da dor neuropática. Entre os principais desafios para a investigação dor translacional é identificar e mensurar a dor espontânea em animais (ou seja, fisiológica, manifestações comportamentais ou de outros que indicam a presença de dor em animais que não estão sendo desafiados com estímulos que são agudamente sobrepostas na condição basal do sujeito sondando ). O objetivo geral deste procedimento é o de induzir uma cirurgicamenteA lesão do nervo infra-orbital em um rato que leva ao desenvolvimento de ambos espontânea e evocada nocifensive comportamento que pode ser usado para estudar os mecanismos envolvidos na dor neuropática trigeminal e o seu tratamento. Dirigido, isolado rosto aliciamento é uma medida única de dor neuropática espontânea em ratos. Após lesão crônica constrição (CCI) do nervo infra-orbital (Ion), os ratos apresentam alterações no comportamento espontâneo e em resposta à estimulação tátil que são indicativos de dor persistente e alodinia mecânica 4. Na sequência de íon-CCI, ratos mostram uma atividade aliciamento rosto aumentou e assimétrica, ou seja, com a lavagem da cara Strokes direcionado principalmente para o território Ion com lesão do nervo. Em contraste com a estimulação nociva da face (por exemplo, a injecção de formalina) 5, não dolorosa distúrbios sensoriais (isto é, corte vibrissas unilateral do nervo infra-orbital do bloqueio anestésico, a aplicação de óleo mineral em vibriSSAE) não, ou apenas muito brevemente (ou seja, os primeiros minutos após o início) induzir uma alteração significativa no comportamento de limpeza cara 6. Concluiu-se que esta preparação anormal depois de íon-CCI é uma manifestação comportamental de espontâneas, sensações fortemente aversivos no território do nervo lesionado. Esse comportamento em ratos íon-CCI carrega forte semelhança com dor espontânea observada em pacientes. Mais estudos identificaram uma diferença importante entre comportamento de limpeza rosto que faz parte de um comportamento de limpeza corpo mais geral (ou seja, &quot;aliciamento rosto durante corpo aliciamento&quot;), que permanece em grande parte afetada pelo íon-CCI, eo rosto nocifensive preparação que não é nem precedida nem seguida de corpo aliciamento (ie, &quot;isolado rosto aliciamento&quot;), que é significativamente aumentada após íon-CCI 7-9. Farmacologicamente, preparação do rosto durante a preparação do corpo constitui uma medição de controle excelente para efeitos não específicos de droga ( <em&gt; por exemplo, sedação) que pode prejudicar a função motora. Movimentos dos membros superiores durante os dois tipos de rosto aliciamento são exatamente os mesmos. Na sequência de íon-CCI, os ratos também apresentam mudanças em resposta à estimulação tátil que são indicativos de alodinia mecânica 4, 10. Durante a primeira semana (s) depois de íon-CCI, os ratos já não respondem ao tátil leve ou moderada (ie, von Frey estímulos). Este hiporeactividade é então substituído abruptamente por uma hiper-reatividade extrema em que até mesmo muito fracas intensidades de estímulo provocar comportamento nocifensive. O início da hiper-responsividade pode variar entre ratos, mas a maioria dos ratos se tornaram hiperresponsivas após três a quatro semanas de pós-operatório.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chromic catgut</td>
			<td>Dynek&#160;</td>
			<td>CG504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nembutal&#160; (pentobarbital)</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clippers for small animals - Favorita II</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>GT104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic instrument</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic ointment (Liposic)</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic monitor system</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>PY8 50-7221-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton applicator</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision cotton swab</td>
			<td>Qosina</td>
			<td>10225</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operation microscope</td>
			<td>Kaps</td>
			<td>SOM 62</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont forceps - Micro-blunted tips (#5/45)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11253-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors - blunt tips</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14574-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyester sutures - Mersilene (4-0)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>R871H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital video camera</td>
			<td>Sony</td>
			<td>HDR-CX330E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>58011</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic constriction injury of the rat's infraorbital nerve (ion-cci) to study trigeminal neuropathic pain

Os modelos animais são importantes ferramentas para estudar a fisiopatologia e farmacologia da dor neuropática. Este manuscrito descreve os procedimentos cirúrgicos e comportamentais para estudar a dor neuropática trigeminal em ratos. Para atender a especificidade de trigeminais síndromes de dor neuropática, o nervo infra-orbital (ION) é submetido a uma lesão por constrição crónica (CCI) do nervo do ligando frouxamente. Uma abordagem intra-orbital é apresentado aqui para expor e ligar o íon na cavidade orbital. Depois de íon de ligação, os ratos apresentam alterações no comportamento espontâneo e em resposta a von Frey cabelo estimulação que são indicativos de dor persistente e alodinia mecânica. Duas fases pode ser definida no desenvolvimento das mudanças de comportamento. Durante a primeira semana seguinte íon-CCI (fase 1), ratos mostram uma atividade aliciamento rosto aumentou e assimétrica, ou seja, com a lavagem da cara Strokes direcionado principalmente para o território Ion com lesão do nervo. É feita uma distinção entre o rosto grooming comportamento que faz parte de um comportamento corpo preparação mais geral, que permanece em grande parte afetada pelo íon-CCI, e cara preparação que não é antecedida nem seguida de aliciamento corpo, o que é significativamente aumentada após íon-CCI. Durante este período, a capacidade de resposta à estimulação mecânica do território de iões é reduzido. Este hiporeactividade é abruptamente substituído por uma hiper-reatividade extrema pela qual ainda muito fracas intensidades de estímulo provocar comportamento nocifensive (fase 2). As semelhanças fenomenológicas entre estas alterações comportamentais e relataram sinais de dor facial (ou seja, as respostas ao estímulo nocivo da face) sugerem a presença de disestesia / parestesia e alodinia mecânica no território Ion ligado.

Ratos íon-CCI mostram um forte aumento pós-operatório na quantidade de tempo gasto no rosto isolado aliciamento (Figura 1). O aumento picos no final da primeira semana de pós-operatório e em seguida, diminui durante as semanas seguintes. A maioria dos estudos recentes descobriram rosto aliciamento para ser significativamente aumentada por até três semanas. Cara comportamento de limpeza em ratos sujeitos a operação simulada é mais ou menos inalterados. Ratos íon-CC...

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Chronic Constriction Injury of the Rat&#039;s Infraorbital Nerve IoN-CCI to Study Trigeminal Neuropathic Pain

This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat&#8217;s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia.

Crônica lesão por constrição de Infraorbital Nerve do Rato (Ion-CCI) para o Estudo do trigêmeo Dor neuropática

Animal models are important tools to study the pathophysiology and pharmacology of neuropathic pain. This manuscript describes the surgical and behavioral ...

chronic-constriction-injury-rat-s-infraorbital-nerve-ion-cci-to-study

Research

JoVE Journal

Medicine

Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve (IoN-CCI) to Study Trigeminal Neuropathic Pain

19.2K visualizações.  University of Antwerp. This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat’s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia. 

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Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of the population1,2. Symptoms include spontaneous (tingling, burning, electric-shock like) pain, dysaesthesia, paraesthesia, allodynia (pain resulting from normally non-painful stimuli) and hyperalgesia (an increased response to painful stimuli). The sensory symptoms are co-morbid with behavioural disabilities, such as insomnia and depression. To study chronic neuropathic pain several animal models mimicking peripheral nerve injury have been developed, one of the most widely used is Bennett and Xie's (1988) unilateral sciatic nerve chronic constriction injury (CCI)3 (Figure 1). Here we present a method for performing CCI and testing pain hypersensitivity.
CCI is performed under anaesthesia, with the sciatic nerve on one side exposed by making a skin incision, and cutting through the connective tissue between the gluteus superficialis and biceps femoris muscles. Four chromic gut ligatures are tied loosely around the sciatic nerve at 1 mm intervals, to just occlude but not arrest epineural blood flow. The wound is closed with sutures in the muscle and staples in the skin. The animal is then allowed to recover from surgery for 24 hrs before pain hypersensitivity testing begins.
For behavioural testing, rats are placed into the testing apparatus and are allowed to habituate to the testing procedure. The area tested is the mid-plantar surface of the hindpaw (Figure 2), which falls within the sciatic nerve distribution. Mechanical withdrawal threshold is assessed by mechanically stimulating both injured and uninjured hindpaws using an electronic dynamic plantar von Frey aesthesiometer or manual von Frey hairs4. The mechanical withdrawal threshold is the maximum pressure exerted (in grams) that triggers paw withdrawal. For measurement of thermal withdrawal latency, first described by Hargreaves et al (1988), the hindpaw is exposed to a beam of radiant heat through a transparent glass surface using a plantar analgesia meter5,6. The withdrawal latency to the heat stimulus is recorded as the time for paw withdrawal in both injured and uninjured hindpaws. Following CCI, mechanical withdrawal threshold, as well as thermal withdrawal latency in the injured paw are both significantly reduced, compared to baseline measurements and the uninjured paw (Figure 3). The CCI model of peripheral nerve injury combined with pain hypersensitivity testing provides a model system to investigate the effectiveness of potential therapeutic agents to modify chronic neuropathic pain. In our laboratory, we utilise CCI alongside thermal and mechanical sensitivity of the hindpaws to investigate the role of neuro-immune interactions in the pathogenesis and treatment of neuropathic pain.

Due to the simplicity of surgery and the robust behavioural outcome, chronic constriction of the sciatic nerve is one of the pre-eminent animal models of neuropathic pain. Within 24 hrs following surgery, pain hypersensitivity is established and can be quantitatively measured using a von Frey aesthesiometer (mechanical test) and plantar analgesia meter (thermal test).

Constrição crônica do nervo ciático e Teste de Hipersensibilidade dor em ratos

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of ...

Medicina

Breathing-controlled Electrical Stimulation (BreEStim) for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

Electrical stimulation (EStim) refers to the application of electrical current to muscles or nerves in order to achieve functional and therapeutic goals. It has been extensively used in various clinical settings. Based upon recent discoveries related to the systemic effects of voluntary breathing and intrinsic physiological interactions among systems during voluntary breathing, a new EStim protocol, Breathing-controlled Electrical Stimulation (BreEStim), has been developed to augment the effects of electrical stimulation. In BreEStim, a single-pulse electrical stimulus is triggered and delivered to the target area when the airflow rate of an isolated voluntary inspiration reaches the threshold. BreEStim integrates intrinsic physiological interactions that are activated during voluntary breathing and has demonstrated excellent clinical efficacy. Two representative applications of BreEStim are reported with detailed protocols: management of post-stroke finger flexor spasticity and neuropathic pain in spinal cord injury.

Breathing-controlled Electrical Stimulation BreEStim for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

The purpose is to present a new method, breathing-control electrical stimulation (BreEStim) for management of neuropathic pain and spasticity.

Respiração controlada Estimulação Elétrica (BreEStim) para tratamento de dor neuropática e espasticidade

Electrical stimulation (EStim) refers to the application of electrical current to muscles or nerves in order to achieve functional and therapeutic goals. ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized by increased urgency and frequency of urination, as well as nocturia and general pelvic pain, especially upon bladder filling or voiding. Despite years of research, the cause of IC/BPS remains elusive and treatment strategies are unable to provide complete relief to patients. In order to study nervous system contributions to the condition, many animal models have been developed to mimic the pain and symptoms associated with IC/BPS. One such murine model is urinary bladder distension (UBD). In this model, compressed air of a specific pressure is delivered to the bladder of a lightly anesthetized animal over a set period of time. Throughout the procedure, wires in the superior oblique abdominal muscles record electrical activity from the muscle. This activity is known as the visceromotor response (VMR) and is a reliable and reproducible measure of nociception. Here, we describe the steps necessary to perform this technique in mice including surgical manipulations, physiological recording, and data analysis. With the use of this model, the coordination between primary sensory neurons, spinal cord secondary afferents, and higher central nervous system areas involved in bladder pain can be unraveled. This basic science knowledge can then be clinically translated to treat patients suffering from IC/BPS.

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized in part by pelvic pain. In order to study nervous system contributions to the condition, a physiological model of urinary bladder pain is used in mice and rats.

Respostas Bexiga Distensão Evocado Visceromotor como um modelo para Bexiga dor em camundongos

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

The Sciatic Nerve Cuffing Model of Neuropathic Pain in Mice

Neuropathic pain arises as a consequence of a lesion or a disease affecting the somatosensory system. This syndrome results from maladaptive changes in injured sensory neurons and along the entire nociceptive pathway within the central nervous system. It is usually chronic and challenging to treat. In order to study neuropathic pain and its treatments, different models have been developed in rodents. These models derive from known etiologies, thus reproducing peripheral nerve injuries, central injuries, and metabolic-, infectious- or chemotherapy-related neuropathies. Murine models of peripheral nerve injury often target the sciatic nerve which is easy to access and allows nociceptive tests on the hind paw. These models rely on a compression and/or a section. Here, the detailed surgery procedure for the &#34;cuff model&#34; of neuropathic pain in mice is described. In this model, a cuff of PE-20 polyethylene tubing of standardized length (2 mm) is unilaterally implanted around the main branch of the sciatic nerve. It induces a long-lasting mechanical allodynia, i.e., a nociceptive response to a normally non-nociceptive stimulus that can be evaluated by using von Frey filaments. Besides the detailed surgery and testing procedures, the interest of this model for the study of neuropathic pain mechanism, for the study of neuropathic pain sensory and anxiodepressive aspects, and for the study of neuropathic pain treatments are also discussed.

Neuropathic pain is a consequence of a lesion or disease affecting the somatosensory system. The &#8220;cuff model&#8221; of neuropathic pain in mice consists of the implantation of a polyethylene cuff around the main branch of the sciatic nerve. Mechanical allodynia is tested using von Frey filaments.

O ciático Nervo cuffing Modelo de Dor Neuropática em Ratos

Neuropathic pain arises as a consequence of a lesion or a disease affecting the somatosensory system. This syndrome results from maladaptive changes in ...

Facial Nerve Axotomy in Mice: A Model to Study Motoneuron Response to Injury

The goal of this surgical protocol is to expose the facial nerve, which innervates the facial musculature, at its exit from the stylomastoid foramen and either cut or crush it to induce peripheral nerve injury. Advantages of this surgery are its simplicity, high reproducibility, and the lack of effect on vital functions or mobility from the subsequent facial paralysis, thus resulting in a relatively mild surgical outcome compared to other nerve injury models. A major advantage of using a cranial nerve injury model is that the motoneurons reside in a relatively homogenous population in the facial motor nucleus in the pons, simplifying the study of the motoneuron cell bodies. Because of the symmetrical nature of facial nerve innervation and the lack of crosstalk between the facial motor nuclei, the operation can be performed unilaterally with the unaxotomized side serving as a paired internal control. A variety of analyses can be performed postoperatively to assess the physiologic response, details of which are beyond the scope of this article. For example, recovery of muscle function can serve as a behavioral marker for reinnervation, or the motoneurons can be quantified to measure cell survival. Additionally, the motoneurons can be accurately captured using laser microdissection for molecular analysis. Because the facial nerve axotomy is minimally invasive and well tolerated, it can be utilized on a wide variety of genetically modified mice. Also, this surgery model can be used to analyze the effectiveness of peripheral nerve injury treatments. Facial nerve injury provides a means for investigating not only motoneurons, but also the responses of the central and peripheral glial microenvironment, immune system, and target musculature. The facial nerve injury model is a widely accepted peripheral nerve injury model that serves as a powerful tool for studying nerve injury and regeneration.

We present a surgical protocol detailing how to perform a cut or crush axotomy on the facial nerve in the mouse. The facial nerve axotomy can be employed to study the physiological response to nerve injury and test therapeutic techniques.

Axotomia do nervo facial em ratos: um modelo para estudo de resposta motoneuron para Injury

The goal of this surgical protocol is to expose the facial nerve, which innervates the facial musculature, at its exit from the stylomastoid foramen and ...

Subcutaneous Trigeminal Nerve Field Stimulation for Refractory Facial Pain

Chronic or neuropathic trigeminal facial pain can be challenging to treat. Neurosurgical procedures should be applied when conservative treatment fails. Neuromodulation techniques for chronic facial pain include deep brain stimulation and motor cortex stimulation, which are complex to perform. Subcutaneous nerve field stimulation is certified for chronic back pain and is the least invasive form of neuromodulation. We applied this technique to treat chronic and neuropathic trigeminal pain as an individual therapy concept. First, trial stimulation is performed. Subcutaneous leads are placed in the painful trigeminal dermatome under local anesthesia. The leads are connected to an external neurostimulator that applies constant stimulation. Patients undergo a 12 day outpatient trial to assess the effect of the stimulation. Electrodes are removed after the trial. If the patient reports pain reduction of at least 50% in intensity and/or attack frequency, a reduction in medication or increase in quality of life, permanent implantation is scheduled. New electrodes are implanted under general anesthesia and are subcutaneously tunneled to an infraclavicular internal pulse generator. Patients are able to turn stimulation on and off and to increase or decrease the stimulation amplitude as needed.
This technique represents a minimal invasive alternative to other more invasive means of neuromodulation for trigeminal pain such as motor cortex stimulation or deep brain stimulation.

Treating chronic or neuropathic facial pain can be challenging when medical or standard treatment fails. Subcutaneous nerve field stimulation is the least invasive form of neuromodulation and is used for chronic back pain. We applied this technology to treat chronic and neuropathic trigeminal facial pain.

Estimulação subcutânea do campo do nervo trigêmeo para dor facial refratária

Chronic or neuropathic trigeminal facial pain can be challenging to treat. Neurosurgical procedures should be applied when conservative treatment fails. ...

Development of Recombinant Proteins to Treat Chronic Pain

Chronic pain is difficult to treat and new approaches to resolve persistent pain are urgently needed. Anti-inflammatory cytokines are promising candidates for treating debilitating pain conditions due to their capacity to regulate aberrant neuro-immune interactions. However, physiologically they work in a network of various cytokines, and therefore their therapeutic effect may not be optimal when used as stand-alone drugs. To overcome this limitation, we developed a fusion protein of the anti-inflammatory cytokines IL4 and IL10. Here, we describe the methods for production and quality control of IL4-10 recombinant fusion protein and we test the effectiveness of the IL4-10 fusion protein to resolve pain in a mouse model of persistent inflammatory pain.

In this paper we provide details for the methods of production and quality control of an IL4-10 recombinant fusion protein. We also show how to test the effectiveness of this protein to resolve pain in a mouse model of inflammatory pain.

Desenvolvimento de proteínas recombinantes para tratar a dor crônica

Chronic pain is difficult to treat and new approaches to resolve persistent pain are urgently needed. Anti-inflammatory cytokines are promising candidates ...

Partial Sciatic Nerve Ligation: A Mouse Model of Chronic Neuropathic Pain to Study the Antinociceptive Effect of Novel Therapies

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. Chronic neuropathic pain results from lesions or diseases in the somatosensory system. To investigate potential therapies with reduced side effects, animal pain models are the gold standard in preclinical studies. Therefore, well-characterized and well-described models are crucial for the development and validation of innovative therapies. 
Partial ligation of the sciatic nerve (pSNL) is a procedure that induces chronic neuropathic pain in mice, characterized by mechanical and thermal hypersensitivity, ongoing pain, and changes in limb temperature, making this model a great fit to study neuropathic pain preclinically. pSNL is an advantageous model to study neuropathic pain as it reproduces many symptoms observed in humans with neuropathic pain. Furthermore, the surgical procedure is relatively fast and straightforward to perform. Unilateral pSNL of one limb allows for comparison between the ipsilateral and contralateral paws, as well as evaluation of central sensitization. 
To induce chronic neuropathic hypersensitivity, a 9-0 non-absorbable nylon thread is used to ligate the dorsal third of the sciatic nerve. This article describes the surgical procedure and characterizes the development of chronic neuropathic pain through multiple commonly used behavioral tests. As a plethora of innovative therapies are now being investigated to treat chronic pain, this article provides crucial concepts for standardization and an accurate description of surgeries required to induce neuropathic pain.

Partial sciatic nerve ligation induces long-lasting chronic neuropathic pain, characterized by exaggerated responses to thermal and mechanical stimuli. This mouse model of neuropathic pain is commonly used to study innovative therapies for pain management. This article describes in detail the surgical procedure to improve standardization and reproducibility.

Ligadura parcial do nervo ciático: um modelo murino de dor neuropática crônica para estudar o efeito antinociceptivo de novas terapias

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. ...

Melhorando a terapia FSN no modelo de rato: minimizando o desconforto e maximizando a eficiência

Efficacy of Fu's Subcutaneous Needling on Sciatic Nerve Pain: Behavioral and Electrophysiological Changes in a Chronic Constriction Injury Rat Model

Fu&#39;s subcutaneous needling (FSN), an invented acupuncture technique from traditional Chinese medicine, is used worldwide for pain relief. However, the mechanisms of action are still not fully understood. During FSN treatment, the FSN needle is inserted and retained in the subcutaneous tissues for a long duration with a swaying movement. However, challenges arise from maintaining a posture while manipulating FSN in animal models (e.g., rats) for researchers. Uncomfortable treatment can lead to fear and resistance to FSN needles, increasing the risk of injury and may even affect research data. Anesthesia may also affect the study results too. Hence, there is a need for strategies in FSN therapy on animals that minimize injury during the intervention. This study employs a chronic constriction injury model in Sprague-Dawley rats to induce neuropathic pain. This model replicates the pain induced by nerve injury observed in humans through surgical constriction of a peripheral nerve, mimicking the compression or entrapment seen in conditions such as nerve compression syndromes and peripheral neuropathies. We introduce an appropriate manipulation for easily inserting an FSN needle into the subcutaneous layer of the animal&#39;s body, including needle insertion and direction, needle retention, and swaying movement. Minimizing the rat&#39;s discomfort prevents the rat from being tense, which causes the muscle to contract and hinder the entry of the needle and improves the study efficiency.

Autor em destaque: Revelando os efeitos terapêuticos do tratamento FSN - Unindo pesquisas e aplicações clínicas na dor neuropática

We present a protocol for using Fu's subcutaneous needling in a chronic constriction injury model to induce sciatic nerve pain in rats.

Eficácia do Agulhamento Subcutâneo de Fu na Dor do Nervo Ciático: Alterações Comportamentais e Eletrofisiológicas em Modelo de Lesão por Constrição Crônica em Rato

Fu&#39;s subcutaneous needling (FSN), an invented acupuncture technique from traditional Chinese medicine, is used worldwide for pain relief. However, the ...