Оценка баланса двигателя и координации в использовании мыши Бревно

Резюме

Дефицит в прекрасной координации движений может быть оценено с помощью теста бревне. Спектакль по луча количественно скорость, с которой луч пересекается и сколько раз мышь скользит по лучу.

Аннотация

Черепно-мозговой травмы, генетические манипуляции, и фармакологические методы лечения могут привести к изменениям моторных навыков у мышей. Изобразительное координации движений и равновесия можно оценить с помощью анализа шагающими балками. Цель этого теста для мыши, чтобы оставаться в вертикальном положении и пройдите через повышенный узкий пучок в безопасную платформу. Этот тест проводится в течение 3 дней подряд: 2 дня обучения и 1 день тестирования. Спектакль по луча количественно, измеряя время, которое требуется для мыши для прохода пучка и числа лапа скользит, которые возникают в процессе. Здесь мы приводим протокол, используемый в нашей лаборатории, и представитель результатов из когорты C57BL / 6 мышей. Эта задача является особенно полезным для обнаружения тонких дефицита моторных навыков и баланса, которые не могут быть обнаружены с помощью других тестов двигателя, таких как Rotarod.

протокол

1. Настоящий Протокол составлен на основе Те из Саутуэлл и др.. др.. (2009) и др. Картер. др.. (2001).

1. Лучевых установок, состоит из 1 метр пучка с плоской поверхности 12 мм или 6 мм) отдыхают 50 см над столешницей на двух полюсах. Черный ящик помещается в конце пучка в точку финиша. (Фанера и другие виды древесины для балок, полюсов, и окна могут быть найдены в большинстве хозяйственных магазинов). Вложенные материал клетки от дома находится в черном ящике для привлечения мыши к финишной точке. Лампы (60 Вт лампочка) используется, чтобы сиять свет над начальной точкой и служит стимулом отвращение. Времени, чтобы пересечь центр 80 см измеряется двумя датчиками движения (сфабриковано Visopia): один на 0 см, что запускает таймер и один на 80 см, который останавливает таймер. Гамак нейлона (который может быть получен из местного магазина ткани) растягивается ниже пучка, ~ 7,5 см выше столешницы, чтобы смягчить любые падает. Видео камера установлена ​​на штатив для записи исполнения. Аппарат, используемый в этой демонстрации был построен на месте.
2. Когорты, по крайней мере 10 мышей для каждого условия, рекомендуется для этого теста. Мыши размещены как группы, когда это возможно, в 12 часов света (с 7 до 7 вечера) / темно-цикла и приспособиться к их клетках в поведенческих объекта, по крайней мере за 2 недели до начала испытаний. Примерно 10 минут до тренировки / тестирования, мыши могут быть доставлены в комнату с пучковой установки.
3. В дни тренировок, каждая мышь пересекает 12 мм луч 3 раза, а затем 6 мм луч 3 раза. Балки более широких ширины (т.е. 28 мм) можно использовать для мышей, которые не могут пересечь узкий те или для увеличения мышей. Мыши размещены на одном конце света и времени, необходимого для кресте, чтобы избежать ящик на другом конце (80 см в гостях) измеряется с помощью датчиков движения. Таймер запускается нос мыши ввода центра 80 см, и остановился, когда животное достигает конца 80 см. Остальные мышей в течение 10 минут в своем доме клетки между тренировками на два луча. В течение этого периода intertrial, еще 3-4 мышей можно научить эффективно использовать время. C57BL / 6 мышей обычно пересекают луч с минимальным количеством остановки или тянет время. Однако, когда они кабина, понюхать или посмотреть вокруг, не исходя вперед, следователь должен поощрять мыши для дальнейшего продвижения вперед подталкивания, тыкая, или нажав на нее сзади перчатке пальцами. Как только мышей в сейф, они могут какое-то время (~ 15 сек), чтобы отдохнуть там до следующего суда. После каждой тренировки, мышей, возвращаются непосредственно в своих клетках дома и доставлен обратно в свои жилищные комнаты. Следует отметить, что мышь может заблокировать больше, если они являются более подготовленными и становиться слишком хорошо знакомы с задачей и аппаратов. С другой стороны, обучение может быть продолжено в течение дополнительных дней, если мышь все равно не пройти весь пучок успешно через 2 дня обучения. Если лечение применяется для мышей, базовый показатель деятельности должны быть получены до начала лечения.
4. В день тестирования, время, чтобы пересечь каждого луча записываются. Два успешных испытания, в которых мыши не ларек на балке усредняются. Видеозаписи могут быть использованы для более точного анализа поскользнуться и другие наблюдаемые дефицита двигателя. Альтернативный способ оценки луч ходьба по неврологических ^1,2 балльной системы, в котором по невозможности пересечь луч, как оценка "1" и возможность пройти луч как правило, с обеими лапами на балке поверхность и менее две ноги скользит, как "7". Скольжения определяется как нога отрывается верхней части балки. В этой системой индексирования, оценка "3" будет соответствовать пересечения луча с помощью перетаскивания конечностей. Животных, что оценки 1 на двух исследованиях не повторно. Описание производительности от пучка, связанные с другими оценки можно найти в Фини и соавт., (1982) и Картер и соавт., (2001).
5. Балки и окна очищают от помета мышей и вытер с полотенцами пропитанной 70% этанолом, а затем водой до следующего луча ставить на аппарат.

2. Представитель Результаты:

Рисунок 1. Типичная крест раз мужской и женской C57Bl6 на 6 мм и 12 мм лучей. Когорты от 9 до 11 недельных мышах C57BL/6-NCRL WT были протестированы на обоих пучков через 2 дня обучения. Среднее время для пересечения 12 мм пучка 4,6 ± 0,4 с для мужчин (п = 14) и 3,3 ± 0,3 сек для женщин (п = 11). Время на 6 мм пучка 6,8 ± 0,7 сек для мужчин (п = 13) и 5,9 ± 0,5 сек для женщин (п = 10) (сообщений об ошибках, как SEM).

Обсуждение

Выступление на бревне является полезной мерой тонкой координации и равновесия, и был утвержден предыдущей работе. Луч тест может обнаружить двигателя дефицит из-за возраста, центральной нервной сист `поражений, и генетических и фармакологических манипуляций у молодых и пожилых грызу?...

Материалы