Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
Method Article
Метод функциональной визуализации мыши коричневой жировой ткани (BAT) описан в котором холодно-стимулированного поглощения 18F-фтордезоксиглюкозы (ФДГ) в НДТ является неинвазивным оценку со стандартизированным протоколом micro-PET/CT. Этот метод является надежным и чувствительным, чтобы обнаружить различия в BAT деятельности на мышах.
Браун жировой ткани (BAT) отличается от белой жировой ткани (WAT) ее дискретным расположением и красно-коричневый цвет из-за богатой васкуляризации и высокую плотность митохондрий. BAT играет важную роль в энергетических затрат и не дрожать термогенеза у новорожденных млекопитающих, а также взрослые 1. BAT-опосредованной термогенез высоко регулируется симпатической нервной системы, преимущественно через β адренергических рецепторов, 2, 3. Недавние исследования показали, что BAT деятельности в человеческом взрослых отрицательно коррелирует с индексом массы тела (ИМТ) и другие параметры, диабетическая 4-6. BAT, таким образом, был предложен в качестве потенциальной мишенью для терапии anti-obesity/anti-diabetes упором на модуляции энергетического баланса 6-8. Хотя несколько холодных задача на основе позитронной эмиссионной томографии (ПЭТ) методы, установленные для обнаружения человека BAT 9-13, по существу, отсутствует стандартизированный протокол для работы с изображениями и quantification НИМ в небольших моделях животных, таких как мыши. Здесь мы опишем надежные ПЭТ / КТ изображений методом функциональной оценки BAT у мышей. Короче говоря, взрослый C57BL/6J мышей были холодные лечение в условиях голодания на продолжительность 4 часа, прежде чем они получили одну дозу 18 F-фтордезоксиглюкозы (ФДГ). Мышей остался в холодном еще на один час после инъекции ФДГ, а затем отсканированы с небольшим животным выделенных micro-PET/CT системы. Полученные изображения ПЭТ были совместно зарегистрированы в КТ-изображений для анатомических ссылки и анализировали на поглощение ФДГ в межлопаточной области BAT представить BAT деятельности. Этот стандартизированный холодной обработки и визуализации протокола было подтверждено путем тестирования деятельностью BAT во время фармакологических вмешательств, например, подавленное BAT активации лечение β-адренорецепторов пропранололом 14, 15, или расширенной активации BAT по β3 агонист BRL37344 16. Метод де-описанными здесь может быть применен для выявления наркотиков / соединений, которые модулируют активность BAT, или чтобы идентифицировать гены / путями, которые участвуют в BAT развития и регулирования в различных доклинические и фундаментальных исследований.
1. Подготовка животных и Лечение холодом
2. Установка Micro-PET/CT изображений Workflow
В этом протоколе micro-PET/CT изображений достигается с Siemens Inveon Выделенный ПЭТ (dPET) системы и Inveon Комплексное (MM) система (КТ / SPECT) в закрепленном режиме. Животное помещается от MM вход, сначала сканируются с КТ для анатомических ссылки, а затем снизилась до центра dPET для статического F18 ПЭТ приобретением. Для того, чтобы включить компьютер для выполнения этих задач последовательного автоматически, следующий "рабочий процесс" запрограммирован на рабочем месте Inveon Acquisition (IAW) программного обеспечения до фактического сессии изображений.
3. Инъекции FDG
4. Micro-PET/CT изображений
5. После анализа изображений
Пример micro-PET/CT изображений мышь BAT показано на рисунке 1. Хотя КТ предоставляет анатомической информации, изображений ПЭТ кодирует распределении и количестве 18 F-ФДГ поглощения по всему телу. Эти визуализации данных может рассматриваться отдельно (1А и 1В), плавленый (1C), ил?...
В этом исследовании micro-PET/CT-based метод визуализации был разработан для обнаружения BAT деятельности у взрослых мышей, которые просто требуют лечения простуды и одной инъекции коммерчески доступные 18 F-ФДГ. Вся процедура может быть сделано в течение одного дня после обработки и визуа...
Нет конфликта интересов объявлены.
Авторы хотели бы поблагодарить Лаура Диаз, Кевин Филлипс, Вилла А. Сюэ, и король С. Ли за их полезные комментарии и техническую поддержку в разработке этого метода.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Название реагента | Компания | Номер в каталоге | Комментарии (по желанию) |
Micro-PET/CT Imaging System | Siemens Medical Solutions USA, Inc | Inveon Выделенный ПЭТ системы и Inveon Комплексное CT / SPECT системы (стыковка) | |
Пропранолол | Сигма | P0884 | |
BRL 37344 | Сигма | B169 | |
18 F-ФДГ | Cyclotope Инк | ||
C57BL/6J самцов мышей | Jackson Laboratory | 000664 | 3-4 месяцев |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены