Зонд на основе конфокальной лазерной Endomicroscopy мочевыводящих путей: Техника

Резюме

Зонд на основе конфокальной лазерной endomicroscopy позволяет в режиме реального времени микроскопии человека мочевых путей во время цистоскопии, обеспечивая динамичное, прижизненной визуализации патологических состояний, таких как рак мочевого пузыря с сотовыми резолюции. Endomicroscopy может увеличить точность диагностики стандартного белого света эндоскопии и обеспечить интраоперационной изображение руководящие указания по повышению хирургической резекции.

Аннотация

Зонд на основе конфокальной лазерной endomicroscopy (CLE) является новой оптической технологии обработки изображений, которая позволяет в режиме реального времени в естественных условиях микроскопии слизистой поверхности во время стандартной эндоскопии. С приложениями в настоящее время в дыхательных ¹ и желудочно-кишечного тракта, ^2-6 CLE также были изучены в мочевых путях для диагностики рака мочевого пузыря. ^7-10 клеточной морфологии и тканей микроархитектуры могут быть решены с микронных масштабах разрешения в режиме реального времени, в дополнение к динамических изображений нормальной и патологической сосудистой ^7.

Зонд на основе НКУ системы (Cellvizio, Мауна-Кеа Technologies, Франция) состоит из многоразового волоконно-оптический зонд, соединенный с изображениями 488 нм блок лазерного сканирования. Датчик изображения вставляется в рабочие каналы стандартного гибкие и жесткие эндоскопы. Эндоскоп на основе CLE системы (OptiScan, Австралия), в котором конфокальной functionalit endomicroscopyУ интегрирована на эндоскоп, также используется в желудочно-кишечном тракте. Учитывая большую сферу диаметром, однако, применение в мочевыводящих путях в настоящее время ограничивается бывший использования естественных условиях ^11. Конфокальной захвата изображений осуществляется с помощью непосредственного контакта зонда с изображениями ткани-мишени и регистрируется в качестве видеоряда. Как и в желудочно-кишечном тракте, endomicroscopy мочевыводящих путей требует exogenenous контрастное вещество, наиболее часто флуоресцеина, который можно вводить внутривенно или внутрипузырно. Внутрипузырного введения является хорошо установленным метод введения фармакологических агентов локально с минимальной системной токсичности, которая является уникальной для мочевыводящих путей. Fluorescein быстро пятна внеклеточного матрикса и имеет установленный профиль безопасности. ¹² изображений зондов различных диаметров обеспечения совместимости с различными эндоскопов калибра. На сегодняшний день, 1,4 и 2,6 мм Зонды были оценены с гибким и пGID цистоскопии ^10. Последние наличие <1 мм изображения зонда ¹³ открывает возможность CLE в верхних мочевых путей во время уретероскопии. Флуоресцентной цистоскопии (т.е. фотодинамической диагностики) и узкой группы изображений дополнительные эндоскоп на основе оптических методов визуализации ^14, которые могут быть объединены с CLE для достижения мультимодальных изображений мочевыводящих путей. В будущем, ДЗ может быть связана с молекулярной контрастных агентов, таких как флуоресцентно меченые пептиды, ¹⁵ и антител для эндоскопической визуализации патологических процессов с молекулярной специфичности.

протокол

1. Подготовка пациента

1. Согласие пациента запланирован на диагностической цистоскопии и других эндоурологических процедур, таких как трансуретральной резекции опухоли мочевого пузыря (ТУР) для CLE. Включить в согласии описание использования внутрипузырного и / или внутривенно флуоресцеина в качестве контрастного вещества. Запросить историю реакции гиперчувствительности на флуоресцеина.
2. Пациент находится в положении, цистоскопия (как правило, в положении литотомия) и подготовлены в стерильных моды.
3. Приступить к стандартной цистоскопии белый свет (WLC) с жесткой или гибкой цистоскопа через уретру.
4. Опрос всех регионах мочевого пузыря при дневном свете (рис. 1) и обратите внимание на регионах, представляющих интерес для расследования CLE.
5. В дополнение к беспроводной локальной сети, мочевого пузыря могут быть отображены с другими макроскопических оптических методов визуализации в том числе флуоресцентной цистоскопии (рис. 2A) или узкой группы изображений (рис. 2В) для IDentify дополнительных областей подозрению следуют характеристику с CLE.
6. Используйте прижигания электрода или резекции цикл разместить небольшой знак прижигания, прилегающих к регионам Интересно, что оба будут отображаемого и биопсию патологических подтверждение. Прижигание знак облегчает повторное локализации для последующего CLE изображений и биопсии.

2. Контрастное вещество

1. Внутрипузырного введения контрастного вещества
   1. Подготовка путем разбавления клинических классе 10% флуоресцеина натрия в стерильного физиологического раствора (0,9% NaCl) до нужной концентрации. Например, подготовить 400 мл 0,1% флуоресцеина путем разбавления 4 мл 10% флуоресцеина в 396 мл физиологического раствора.
   2. Вставьте стерильную мочевого катетера в мочевой пузырь и привить разбавленного контрастного вещества под действием силы тяжести использованием 60 мл катетера кончик шприца.
   3. Зажмите мочевой катетер провести пребывающего контрастного вещества в течение 5 мин.
   4. Слейте контрастного вещества из мочевого пузыря. Используйте 60 мл окtheter наконечник шприца, чтобы смыть остаточный отличие от мочевого пузыря с использованием физиологического раствора, около 240-300 мл.
   5. Приступить к CLE изображений.
2. Внутривенные инъекции флуоресцеина
   1. Ничья 1,0 мл флуоресцеина в шприц. Прикрепите шприц для внутривенного доступа и вводят 0,5 - 1,0 мл флуоресцеина внутривенно в виде болюса. Флеш соответствии с физиологическим раствором. Обычно это делается по команде анестезии в операционной комнате.
   2. Приступить к CLE изображений.

3. CLE изображений

1. Снимите стерилизованные CLE изображений зонда (Cellvizio) из упаковки и подключить его к блоку лазерного сканирования (Мауна-Кеа Technologies, Париж, Франция)
2. Разминка и калибровки изображений зондом, следуя инструкциям производителя.
3. Вставьте цистоскоп или резектоскопа в мочевой пузырь. Используйте 0 градусов объектив с жесткого цистоскопа.
4. Переход CLE изображений зонда вдоль гореrking канал цистоскопа с наконечником раз за цистоскопа.
5. Под белым светом, найдите ранее отмеченных регионах, представляющих интерес. Используйте дополнительные физиологический орошения, необходимых для визуализации слизистой оболочки и поддерживать умеренный растяжение мочевого пузыря.
6. Манипулирование CLE изображений зонда с руки оператора для прямого контакта лицом ан регионах, представляющих интерес. Для оптических срезов регионах, представляющих интерес, осторожно увеличивать и уменьшать давление на изображение зонда при сохранении прямого контакта.
   1. Чтобы добраться до опухоли расположены на передней мочевого пузыря, стандартный Albarran мост может способствовать отклонению изображений зонда для прямого контакта с интересующей области (рис. 2).
7. Общие регионов интересных объектов папиллярных опухолей, не папиллярных опухолей, переход между нормальной слизистой оболочки и появляются опухоли, и эритематозные пятна, которые могут быть отображены с помощью либо внутривенноклассическими или внутривенного введения флуоресцеина. Внутривенное флуоресцеина необходимо для визуализации резекции кровать, железы мочеиспускательного канала, уретры и полового члена.
8. Как зонд сканирует изображение интересующей области, изображений записи для последующего анализа. Обратите внимание, общей клеточной морфологии, границы, организация и присутствие нео-ангиогенез.
9. После завершения обработки изображений, удалить CLE изображений зонда от рабочего канала.
10. При желании получить холодные чашки биопсии из соответствующих регионах, представляющих интерес, которые были отсканированы на CLE. Используйте прижигания маркировки в качестве ориентиров для сотрудничества регистрации отображаемой области, которые биопсию.
11. Завершить ТУР в рутину. У пациентов, получавших внутривенное флуоресцеина, рассмотреть возможность использования непрерывной резектоскопы потока для улучшения визуализации во время резекции, как флуоресцеин выводится через почки в мочевой пузырь примерно через 5 мин после внутривенного введения.
12. Получить сохраненных записей изображения с конфокальной процессора и CONDUКТ анализа изображений.

Результаты

CLE сохраняются изображения в градациях серого видео файлов последовательности в 12 кадров в секунду. Изображение интерпретация осуществляется в режиме реального времени и могут быть использованы для воздействия принятия клинических решений по исследуемым протокол. Offline анализа, кото?...

Обсуждение

Достижение и поддержание твердых лицо ан контакта между зондом изображения и слизистой оболочки мочевого пузыря является наиболее важным шагом в получении оптимального качества изображения. Существует около 3-5 пациентов кривая обучения развивать ловкость, чтобы манипулировать...

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Название реагента	Компания	Номер в каталоге	Комментарии (по желанию)
Cellvizio 100 Series	Мауна-Кеа технологий	Серия 100	Включает в себя процессор и конфокальной LSU: F400-v2 при 488 нм
Cellvizio конфокальной Miniprobe	Мауна-Кеа технологий	Gastroflex UHD
АК-FLUOR 10%	Akorn, Inc	NDC 17478-253-10