JoVE Logo

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Мы описываем образовательный набор, который позволяет пользователям выполнять несколько экспериментов и получить практический опыт работы с цифровой микрофлюидой.

Аннотация

В настоящем документе описывается образовательный комплект, основанный на цифровой микрофлюиде. В качестве конкретного примера приводится протокол эксперимента по химилюминесценции на основе люминола. Он также имеет флуоресцентные изображения и закрытый увлажненные корпуса на основе ультразвукового форсунки для предотвращения испарения. Комплект может быть собран в течение короткого периода времени и с минимальным обучением электронике и припою. Комплект позволяет как студентам/аспирантам, так и энтузиастам получить практический опыт работы с микрофлюидой интуитивно и быть обученными знакомству с цифровой микрофлюидой.

Введение

Микрофлюиды является весьма междисциплинарной области расчесывания физики, химии, биологии и инженерии для манипуляции небольшой объем жидкостей, начиная от фемтолитров до микролитров1. Микрофлюиды также является очень широким и активным полем; Поиск Web of Science возвращает почти 20 000 публикаций, и все же не хватает литературы и обзорных работ по использованию микрофлюиды в качестве учебногопособия 2. Есть две проницательные, хотя и устаревшие обзорные статьи Легге и Финченко3,4. Legge знакомит педагогов с идеей лаборатории на чипе3. Финченко указал на роль лаборатории микрофлюиды в обучении научно-технологической инженерной математике (STEM) и упростил философию в "учить микрофлюидуиду" и "использовать микрофлюидуиду"4. Более поздний обзор Rackus, Ridel-Kruse и Pamme в 2019 году указывает на то, что в дополнение к междисциплинарному характеру, микрофлюиды также очень практический вопрос2. Практическая деятельность, связанная с практикой микрофлюиды, предоставляет учащимся обучение на основе исследований и делает его привлекательным инструментом для научной коммуникации и информационно-пропагандистской работы. Микрофлюиды действительно предлагает большой потенциал для научного образования в формальной и неформальной обстановке, а также является идеальным "инструментом", чтобы воодушевить и просвещать общественность о междисциплинарном аспекте современных наук.

Такие примеры, как недорогие микроканальные устройства, бумажная микрофлюиду и цифровая микрофлюиды, являются идеальными инструментами для образовательных целей. Среди этих платформ, цифровые микрофлюиды остается эзотерической и рецензируемых докладов, основанных на цифровой микрофлюидыне хватает 2. Здесь мы предлагаем использовать цифровую микрофлюиду в качестве образовательного инструмента по нескольким причинам. Во-первых, цифровая микрофлюиду очень отличается от микроканальной парадигмы, поскольку она основана на манипуляции каплями и использовании капель в качестве дискретных микровесов. Во-вторых, капельками манипулируют на относительно общих электродных платформах, поэтому цифровая микрофлюида может быть тесно соединена с микроэлектроникой. Пользователи могут использовать расширенный набор электронных компонентов, теперь очень доступны для сделай сам приложений в электронном интерфейсе с каплями. Таким образом, мы утверждаем, что цифровые микрофлюиды могут позволить студентам испытать эти уникальные аспекты и быть открытыми не слишком придерживаться микроканальной основе низкой Рейнольд номер микрофлюиды1.

Короче говоря, область цифровой микрофлюиды в значительной степени основана на явлениях электроодкивания, которые были впервые описаны ГабриэльЛиппманн 5,6. Последние события были инициированы Берже в начале 1990-хгодов 7. Его ключевым вкладом является идея введения тонкого изолятора для отделять проводящие жидкости от металлических электродов, чтобы устранить проблему электролиза. Эта идея была термином, как электроотвод на диэлектрических (EWOD). Впоследствии цифровая микрофлюиды была популяризирована несколькими исследователями-первопроходцами8,9. Теперь полный список приложений, например, в клинической диагностике, химии и биологии, былдоказан на цифровой микрофлюиды 10,11,12 и, следовательно, множество примеров доступны для образовательных учреждений. В частности, по линии низкой стоимости, сделай сам цифровые микрофлюиды, Абдельгавад и Уилер ранее сообщали о недорогих, быстрых прототипах цифровых микрофлюидов13,14. Fobel и др., также сообщил DropBot как с открытым исходным кодом цифровой микрофлюидной системы управления15. Yafia и др., также сообщили портативные цифровые микрофлюиды на основе 3D печатных частей и меньше телефон16. Alistar и Gaudenz также разработали платформу OpenDrop на батарейках, которая основана на транзисторном массиве полевого эффекта и активацииDC 17.

Здесь мы представляем цифровой микрофлюиды образовательный комплект на основе коммерчески источников печатной платы (PCB), что позволяет пользователю собирать и получать практический опыт работы с цифровой микрофлюиды (Рисунок 1). Плата за услуги по созданию ПКБ из цифровых файлов дизайна широко доступна, и поэтому мы считаем, что это жизнеспособное недорогое решение для образования при условии, что цифровые файлы дизайна могут быть общими. Тщательный выбор компонентов и системного дизайна сделан для упрощения процесса сборки и создания интерфейса с интуитивно понятным пользователем. Таким образом, конфигурация одной пластины используется вместо двух пластин конфигурации, чтобы избежать необходимости в верхней пластине. Как компоненты, так и испытательные химические вещества должны быть легко доступны. Например, пищевая пленка из супермаркета используется в качестве изолятора в нашем комплекте.

Чтобы доказать осуществимость нашего комплекта, мы предлагаем конкретный химический эксперимент, основанный на химилюминесценции люминола и предоставляем протокол. Есть надежда, что визуальное наблюдение за химилюминесценцией может воодушевить и возбудить студентов. Luminol является химическим веществом, которое проявляет синее свечение при смешивании с окисливляющеевещество, такое какH 2 O2 и, как правило, используется в судебно-медицинской экспертизы дляобнаружения крови 18. В нашей лабораторной обстановке катализатором выступает феррикианин калия. Люминол реагирует с ионом гидроксида и образует дианион. Впоследствии дианион реагирует с кислородом из перекиси водорода, чтобы сформировать 5-аминофталиновой кислоты с электронами в возбужденном состоянии, и расслабление электронов от возбужденного состояния до состояния земли приводит к фотонам, видимым как взрыв синего света.

Мы также сообщаем об эксперименте с флуоресцентной визуализацией со смартфоном, чтобы продемонстрировать интеграцию светоизлучающего диода (LED) в качестве источника возбудительного света. Наконец, испарение капель является проблемой микрофлюиды, но редко решается. (1 йл капли воды теряется в пределах 1 ч от открытого субстрата3.) Мы используем распылитель на основе высокочастотного преобразователя пьезо для преобразования воды в мелкий туман. Это создает увлажняемую среду для предотвращения испарения капель и демонстрирует долгосрочную активацию капель (1 ч).

figure-introduction-7104
Рисунок 1: Схема EWOD создана. (a) Микроконтроллер используется для обеспечения последовательности управления электродом EWOD. Кроме того, влажность контролируется. b)Схема макета ПХД. Помечены электроды, светодиоды для флуоресцентных изображений, резистор и транзисторы полевого эффекта (FET). Также показана шкала бар 1 см. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.

figure-introduction-7823
Рисунок 2: Верхний вид комплекта. Помечены доска микроконтроллера, высоковольтная доска питания, EWOD PCB, датчик влажности и распылитель. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.

протокол

1) Сборка комплекта цифровой микрофлюиды

  1. Solder резисторы поверхностного крепления, транзисторы и светоизлучающие диоды на доске ПХД в соответствии со схемами на рисунке 1b.
  2. Подключите выход высоковольтной доски питания к доске ПХД с припойными компонентами(рисунок 2 и дополнительный рисунок 1).
  3. Подключите батарею к доске усилителя напряжения, чтобы увеличить напряжение с 6 V до 12 V(рисунок 2 и дополнительный рисунок 1).
  4. Подключите высоковольтную доску питания к доске усилителя напряжения, чтобы увеличить напряжение с 12 V до 230 V(рисунок 2 и дополнительный рисунок 1).
  5. Подключите датчик влажности к доске микроконтроллеров. Подключите ультразвуковой распылитель пьезо и доску драйвера форсунки к доскемикроконтроллеров (рисунок 2 и дополнительная цифра 1).
  6. Поместите всю сборку в акриловый корпус размеров 23 см х 20,5 см х 6 см.
  7. Включите микроконтроллер с кодом(дополнительныйкод) и используйте цифровой мультиметр для измерения напряжения электрода EWOD, чтобы убедиться, что выходное напряжение составляет 230 В. Отрегулируйте переменный резистор высоковольтной доски питания таким образом, чтобы выходное напряжение составило 230 В (Дополнительная цифра 2).

2) Подготовка изолятора на электродной решетке

  1. Носите чистые нитриле перчатки. Используйте микропипюту, чтобы наложить 10 йл из 5 cSt силиконового масла на область электрода и использовать палец для равномерного распространения силиконового масла на области электрода. Обратите внимание, что силиконовое масло служит в качестве заполнения между электродом и пищевой оберткой изолятора и, чтобы избежать каких-либо воздушных кранов.
  2. Вырезать кусок пищевой пленки с размерами около 2,5 см х 4 см и поместить его на верхней части электрода. Используйте micropipette для применения 10 йл 5 cSt силиконового масла на области электрода и использовать палец для равномерного распространения силиконового масла. Обратите внимание, что силиконовое масло служит гидрофобным слоем поверх изолятора.

3) Эксперимент по химилюминесценции на основе люминола

  1. Смешайте 0,25 г люминола и 1,6 г NaOH в 25 мл деионизированной воды в стакане со стеклянным мешалки, чтобы получить раствор.
  2. Смешайте 20 мл раствора с предыдущего шага с 20 мл 3% перекиси водорода.
  3. Используйте микропипюту, чтобы поместить 2-5 МКЛ раствора люминола с предыдущего шага на электрод цели.
  4. Используйте микропипет для того чтобы поместить 10 l 0.1% w/w феррикяид калия на электроде. Обратите внимание, что это капля, которая будет перемещена для электроодкивания.
  5. Включите микроконтроллер, чтобы переместить 10 капли калия феррикязида, чтобы слиться с люминолом.

4) Флуоресцентный эксперимент изображений

  1. Вырежьте кусок полупрозрачной ленты с габаритами 1 см х 1 см. Поместите полупрозрачную ленту между возбуждающим светоизлучающим диодом и электродами EWOD.
  2. Прикрепите фильтр излученного цвета стекла на камеру смартфона лентой.
  3. Смешайте 2,5 мг фторсхейна изотиоцианата в растворе аквеозного этанола (3% ж/в).
  4. Пипетка 10 мкл раствора с предыдущего шага на одном из электродов.
  5. Включите микроконтроллер.
  6. Используйте смартфон для записи видео droplet актуации.

5) Долгосрочный эксперимент по активации капель с ультразвуковым форсункой

  1. Поместите 1 мл воды на ультразвуковой распылитель. Обратите внимание, что код написан с использованием алгоритма пороговой обратной связи для поддержания уровня влажности более 90%.
  2. Поместите каплю 10 МКЛ с микропайпеттом. Включите микроконтроллер и немедленно закройте крышку корпуса.
  3. Подождите 1 ч. Визуально проверьте актуацию капель.

Результаты

Актуация капель записывается с помощью смартфона. Репрезентативные результаты по химилюминесценции и флуоресцентной визуализации отображаются на рисунке 3 и рисунке 4. Для эксперимента по химилюминесценции капля 10 йл феррикианида пр?...

Обсуждение

Описанная здесь процедура позволяет читателю собрать и протестировать рабочую систему EWOD для активации капель и получить практический опыт работы с микрофлюидой. Мы намеренно избегаем дорогих компонентов и химических образцов. В настоящее время, один комплект может быть построен за $...

Раскрытие информации

Авторов нечего раскрывать.

Благодарности

Y. T. Y. хотел бы отметить финансовую поддержку со стороны Министерства науки и техники в соответствии с номерами грантов MOST 107-2621-M-007-001-MY3 и Национального университета Цин Хуа в рамках гранта номер 109-2702E1. Марк Курбан из Edanz Group (https://en-author-services.edanzgroup.com/ac) отредактирован проект этой рукописи.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
Acrylic enclosureLOCAL vendor23cm x 20.5 cm x 6cm
Ardunion UnoArduinoUNOmicrocontroller board
acetic acidSigma Alrich695092-100ML
BreadboardMCIGICM400tie4 cm x 7 cm, 400 Points Solderless Breadboard, a pack of 4
BSP89 H6327 Infineon MOSFET Mouser726-BSP89H6327drain soure breakdown voltage 240V,on resistance 4.2 ohm
citrid acidsigma Alrich251275-100G
Color glass filter ThorlabsFGL 530color glass filter for fluorescent imaging
DHT11 temperature & humidity sensoradafruit
Digital multimeter Fluke17B
Fluorescein isothiocyanate isomer Isigma AlrichF7250-50MG50 mg price, fluorescent imaging
GlycerolSigma AlrichG9012-500ML
High voltage power supply for Nixe tubeVaorwneNCH6100HVHigh voltage power max dc 235V
LM2596 voltage booster circuitboost voltage from 5V to 12 V
LuminolSigma Alrich123072-5G5 g for $110
PippetThermal Fisher1- 10 ul
Printed circuit board Local vender10 piece for $60
Plastic food wrapKirklandStretch-tite food wrap Plastic food wrap
Potassium ferricynideMerck1049821 kg
1N Potassium hydroxide solution (1 mol/l) Scharlau 1 Liter
Clear Office tape 3mm3M Scotchsemi-transparent, used as diffuser for illumination
saltGreat Value Iodized Salt6 oz for $7 salt from supermarket
Silicone oil (5Cst)Sigma Alrich317667-250MLtop hydrophobic layer & filling layer between electrode and insulator
sucrosetable sugar  from any supermarket, 6 dollar per pound
Surface mount blue LEDoznium3528Oznium 20 Pieces of PLCC-2 Surface Mount LEDs, 3528 Size SMD SMT LED - Blue
Surface mount resistor 180k OhmBalance World Inc3mm x 6 mm 1watt
Surface mount resistor 510OhmBalance World Incbias resistor for LED, 3mmx6mm 1watt
Water atomizerGrove operating frequency 100 kHz  supply votage 5V max 2W  The kit comes with ultrasonic transducer
high voltage transistor

Ссылки

  1. Convery, N., Gadegaard, N. 30 years of microfluidics. Micro and Nano Engineering. 2, 76-91 (2019).
  2. Rackus, D. G., Ridel-Kruse, I. H., Pamme, N. Learning on a chip: Microfluidics for formal and informal science education. Biomicrofluidics. 13, 041501 (2019).
  3. Legge, C. H. Chemistry under the microscope-Lab on a chip technologies. Journal of Chemical Education. 79, 173 (2002).
  4. Fintschenko, Y. Education: a modular approach to microfluidics in the teaching laboratory. Lab On A Chip. 11, 3394 (2011).
  5. Mugele, F., Baret, J. -. C. Electrowetting: from basics to applications. Journal of Physics: Condensed Matter. 17, 705-774 (2005).
  6. Lippmann, G. Relations entre les phenomenes electriques et capillary. Ann. Chim. Phys. 6, 494 (1875).
  7. Berge, B. Electrocapillarite et mouillge de films isolant par l'eau. C. R. Acad. Sci. II. 317, 157 (1993).
  8. Pollack, M. G., Fair, R. B., Shenderov, A. D. Electrowetting-based actuation of liquid droplets for microfluidics applications. Applied Physics Letters. 77, 1725 (2000).
  9. Lee, J., Kim, C. J. Surface-tension-driven microactuation based on continuous electrowetting. Journal of Microelectromechanical Systems. 9 (2), 171 (2000).
  10. Choi, K., Ng, A. H. C., Fobel, R., Wheeler, A. R. Digital Microfluidics. Annual Review of Analalytical Chemistry. 5, 413-440 (2012).
  11. Jebrail, M. J., Wheeler, A. R. Let's get digital: digitizing chemical biology with microfluidics. Current Opinion in Chemical Biology. 14, 574-581 (2000).
  12. Pollack, M. G., Pamula, V. K., Srinivasan, V., Eckhardt, A. E. 2011. Applications of electrowetting-based digital microfluidics in clinical diagnostics. Expert Review of Molecular Diagnostics. 11, 393-407 (2011).
  13. Abdelgawad, M., Wheeler, A. R. Rapid prototyping in copper substrates for digital microfluidics. Advanced Materials. 19 (1), 133-137 (2007).
  14. Abdelgawad, M., Wheeler, A. R. Low-cost, rapid-prototyping of digital microfluidics devices. Microfluidics and Nanofluidics. 4, 349-355 (2008).
  15. Fobel, R., Fobel, C., Wheeler, A. R. DropBot: an open-source digital microfluidic control system with precise control of electrostatic driving force and instantaneous drop velocity measurement. Applied Physics Letters. 102, 193513 (2013).
  16. Yafia, M., Ahmadi, A., Hoorfar, M., Najjaran, H. Ultra-portable smartphone controlled integrated digital microfluidic system in a 3D-printed modular assembly. Micromachines. 6 (9), 1289-1305 (2015).
  17. Alistar, M., Gaudenz, U. OpenDrop: an integrated do-it-yourself platform for personal use of biochips. Bioengineering. 4 (2), 45 (2017).
  18. Khan, P., et al. Luminol-based chemiluminescent signals: clinical and non-clinical application and future uses. Applied Biochemistry and Biotechnology. 173 (2), 333-355 (2014).
  19. Agresti, J. J., et al. Ultrahigh-throughput screening in drop-based microfluidics for directed evolution. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (9), 4004-4009 (2010).
  20. . Microfluidics Available from: https://microfluidics.utoronto.ca/dropbot/ (2020)
  21. Busnel, J. M., et al. Evaluation of capillary isoelectric focusing in glycerol-water media with a view to hydrophobic protein applications. Electrophoresis. 26, 3369-3379 (2005).
  22. Chatterjee, D., Shepherd, H., Garrell, R. L. Electromechanical model for actuating liquids in a two plate droplet microfluidic device. Lab On A Chip. 9, 1219-1229 (2009).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

170

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Исследования

Образование

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены