Calcium Transient Measurements in hiPSC-CMs

Растворите аликвоты Fura-2 AM в растворе Tyrode, чтобы получить конечную концентрацию 1 микромоляра Fura-2 AM для добавления в клетки. Аспирируйте среду и замените ее раствором Тироде, содержащим фуру-2 АМ. Инкубируйте в течение 15 минут при температуре 37 градусов Цельсия в инкубаторе или оптической измерительной системе. Удалите раствор Тирода, содержащий Фура-2 АМ, и промойте лунки два раза свежим раствором Тироде.

Наконец, инкубируйте клетки в растворе Тироде еще пять минут при температуре 37 градусов Цельсия, чтобы обеспечить деэтерификацию Fura-2 AM. Поместите пластину внутрь оптической измерительной системы, чтобы продолжить измерения сократительной способности. Выберите лунку, выберите область внутри скважины для наблюдения за синхронизированным сокращением и расслаблением, а затем нажмите кнопку Пуск и добавьте измерение. В дополнение к следам сократимости, на экране в режиме реального времени появляется ратиометрический кальциевый переходный процесс.