Для выполнения криотравмы миомер у рыбок данио-рерио используйте изготовленный на заказ криозонд из нержавеющей стали. Чтобы избежать обморожения при обращении с зондом во время процедуры, вставьте ручку зонда в наконечник пипетки и закрепите его, обернув скотчем. Прежде чем приступить к процедуре криотравмы, подготовьте стакан для рабочего раствора для анестезии, ложку для работы с рыбой, влажную губку и резервуар с системной водой для восстановления рыбы после процедуры.
Приготовьте исходный раствор для анестезии, следуя инструкциям на экране. Затем добавьте четыре миллилитра приготовленного исходного раствора в 100 миллилитров системной воды в стакане, чтобы приготовить рабочий раствор трикаина. Чтобы начать процедуру криотравмы, погрузите зонд в жидкий азот минимум на три минуты.
Смочите губку в системной воде и положите ее на ровную поверхность. Затем через одну-две минуты после переноса одной взрослой рыбки данио-рерио в рабочий раствор трикаина подтвердите ее невосприимчивость, осторожно прикоснувшись ложкой к рыбе. Поместите обезболиваемую рыбу на влажную губку.
Расположите хвостовой цветонос кзади от анального плавника и спереди от хвостового плавника. На этом этапе извлеките криозонд из жидкого азота. Осторожно встряхните зонд, чтобы убедиться, что на наконечнике не осталось остатков жидкого азота.
Расположите край шпателя перпендикулярно телу на хвостовом цветоносе. Держите зонд в этом положении в течение шести секунд, не оказывая давления, прежде чем выпустить криозонд из ткани. Затем переведите рыбу в системную воду в резервуар для восстановления.
Следите за рыбой, пока она возобновляет дыхание и плавание после пробуждения от наркоза. Если оперкулярные движения не происходят через 30 секунд, стимулируйте рыбу, пипеткой вводя воду в жабры до тех пор, пока животное не начнет дыхание самостоятельно. Видеозапись контрольной и криотравмированной рыбы в один день после травмы или DPCI показала, что, хотя криотравмированные рыбы плавали менее активно, они не проявляли каких-либо аномальных движений, таких как завихрение, свертка или снижение равновесия.
В системе животноводства их положение в аквариуме и прием пищи были аналогичны положениям неповрежденных рыб. Как наблюдалось в 5 DPCI, нормальное поведение все еще оставалось постоянным, что указывает на то, что процедура криотравмы не сильно повлияла на самочувствие животных.
