Для начала введите Мелоксикам подкожно самцу мыши C57 Black 6J в возрасте от шести до восьми недель за 30 минут до процедуры для облегчения боли. После обезболивания мыши прищипните пальцы ног и подтвердите отсутствие рефлекса. Нанесите одну каплю 0,5% пропаракаина на поверхность роговицы одного глаза и каплю искусственных слез на другой глаз.
Затем с помощью двухмиллиметрового пробойника для биопсии выбейте диски из фильтровальной бумаги Ватмана. Добавьте два микролитра одного нормального гидроксида натрия в чистую чашку Петри и поместите диск фильтровальной бумаги на каплю гидроксида натрия, дав ему впитаться в течение 15 секунд. С помощью щипцов возьмите фильтровальную бумагу и приложите ее к обработанному пропаракаином глазу в центре роговицы на 30 секунд.
Промыть глаз путем промывания 20 миллилитрами стерильного физиологического раствора в шприце. Аккуратно сотрите излишки физраствора с глаз и окружающей области с помощью одноразовых мягких салфеток. Поместите мышь в клетку для восстановления на теплую грелку до амбулаторного состояния.
На 10-й день, после ожога, сделайте ОКТ-изображения переднего отрезка глаза в виде объемного сканирования в режиме ИК-ОКТ с углом обзора 30 градусов и 100% интенсивностью ИК-излучения. Неоваскуляризация роговицы проросла из сосудов лимба к центру роговицы в щелочном обожженном мышином глазу, но не в здоровом глазу. Группа щелочных ожогов продемонстрировала значительно повышенные показатели неоваскуляризации и помутнения по сравнению с контрольной группой.
Иммуноокрашивание роговицы кровеносных и лимфатических сосудов показало значительно более высокую плотность кровеносных и лимфатических сосудов через 10 дней в ожоговой группе по сравнению с контрольной группой. Толщина роговицы, визуализированная и количественно определенная с помощью ОКТ, была значительно выше в ожоговой группе.
