Сворачивание и зондирование конструкций нуклеиновых кислот

Начните с пипетирования растворов G4-TBA, одноцепочечного TBA и двухцепочечного TBA в три разные пробирки для складывания. Нагрейте образцы до 95 градусов Цельсия в течение пяти минут. Дайте им медленно остыть до комнатной температуры.

Как только пробирки остынут до комнатной температуры, центрифугируйте пробирки. Далее организуйте по три комплекта, каждый из семи пустых автоклавных пробирок объемом 0,5 миллилитров. Добавьте в каждую трубку по три микролитра сверхчистой воды.

Пипеткой введите пять микролитров свернутых конструкций нуклеиновых кислот в каждую пробирку набора. Затем добавьте два микролитра 25 или 250 микроляров B-CEP1, чтобы получить концентрацию в пяти и 50 микромолях зонда соответственно. В три контрольные трубки добавьте вместо соединения сверхчистую воду и инкубируйте все образцы при температуре 37 градусов Цельсия.

Остановите реакцию, поместив пробирки при температуре 20 градусов Цельсия, затем высушите образцы в вакуумной центрифуге.