Регенерация чешуи данио-рерио in vivo

Начните с того, что пересадите рыбок зебра из их основных аквариумов в отдельные аквариумы, возвращая их в аквариумы после визуализации. Погрузите рыбу-зебру в 0,05%-ный сульфонат трикаина метана, чтобы обезболить рыбу. Используя камеру, сделайте снимок каждой рыбы рядом с линейкой, чтобы записать размер, длину и состояние здоровья.

Затем поместите обезболиванную рыбу на чашку Петри с влажной салфеткой. Положите рыбу на бок и выполните изображение бока с помощью стереомикроскопа при соответствующем увеличении. Соберите чешуйки с помощью тонкого пинцета и щипцов под стереомикроскопом и перенесите их в 1,5 или 2-миллилитровые пробирки для последующего окрашивания.

Для выполнения окрашивания щелочной фосфатазой и окрашиванием по Коссе переложите чешуйки в пробирки с деионизированной водой Milli-Q. Делайте снимки отдельных собранных чешуек, прежде чем переносить их в пробирки. Раннее формирование новообразованных чешуек можно наблюдать на 2-й день регенерации.

Регенерированные шкалы показали более высокую экспрессию OSX по сравнению с 0-м днем по генетическим шкалам.