Начните с того, что положите на рабочую поверхность чистую накладку или драпировочный материал. Прикрепите носовой конус испарителя изофлурана к поверхности скотчем, убедившись, что он обращен в сторону от экспериментатора. Прикрепите иглу длиной 10 миллиметров и 27-го калибра со скосом 45 градусов к стеклянному шприцу объемом пять микролитров.
Добавьте силастическую трубку к игле, позволив выступить 3,5 миллиметра наконечника, и закрепите трубку лабораторной лентой к корпусу шприца. Затем наберите три микролитра инъекционной среды в стеклянный шприц, первоначально набирая больше, чем необходимо, а затем выбрасывая излишки, пока не останется только три микролитра. Запустите лабораторный таймер в режиме обратного отсчета и расположите его так, чтобы его можно было легко просматривать во время инъекций.
После тренировки перемещения иглы в боковом и каудальном направлениях подготовьте обезболиваемую мышь к инъекции, предварительно очистив место инъекции йодом, а затем спиртом три раза. Определите место инъекции с помощью иглы 18-го калибра, пропустив ее через место трепанации черепа. Чтобы сделать укол мыши, сначала крепко возьмитесь за голову мыши недоминантной рукой.
Расположите головку ровно на рабочей поверхности. Далее поместите иглу стеклянного шприца через отверстие в черепе до тех пор, пока трубка не упрется в кожу мыши. Держа шприц вертикально в корональной и сагиттальной плоскостях, медленно вводите средство в течение одной минуты.
Подержите шприц и иглу еще минуту, чтобы свести к минимуму обратный поток. Затем медленно втяните иглу. Извлеките мышь из носового обтекателя.
Смойте кровь с места инъекции стерильной марлей и поместите мышь в клетку на клетку с подогревом до пробуждения. Кратковременное воздействие газовой анестезии и введение трех микролитров жидкости в желудочковую систему сами по себе не изменили пульсирующую секрецию лютеинизирующего гормона. Инъекционные тракты были видны в нервной ткани и пересекались с латеральным желудочком.
