Для начала прикрепите капилляр боросиликатного стекла к резиновым амортизирующим зажимам в ручном вертикальном съемнике микропипетки. Установите температуру нагрева съемника микропипеток на 950 градусов Цельсия и выполните предварительное вытягивание для получения более тонкого и мягкого стеклянного капилляра. Затем установите температуру нагрева на 790 градусов Цельсия и выполните вторичное вытягивание для получения окончательных микропипеток.
С помощью кофемолки для микропипеток тщательно заточите отверстие наконечника до внешнего диаметра 11 микрометров. Затем поместите микропипетки в губчатую прижимную губку внутри стеклянной банки. Оплодотворенные куриные яйца инкубируют до стадии развития 18 в увлажненном качающемся инкубаторе с температурой 37 градусов Цельсия.
Тщательно протрите рабочую зону 70% этанолом. После развития выньте яйца из инкубатора. Сбрызните яйца 70% этанолом и дайте им высохнуть на воздухе.
Затем поместите яйцо на держатель для яиц большим концом вверх. С помощью пары острых зубчатых щипцов осторожно постучите по большему концу яичной скорлупы, чтобы создать отверстие диаметром два сантиметра. Затем удалите осколки яичной скорлупы.
Поместите яйцеклетку на предметный столик для препарирования микроскопа и найдите эмбрион. Затем с помощью тонких рассекающих щипцов и ножниц отрежьте амниотическую оболочку, покрывающую верхнюю часть эмбриона. Затем поместите 60-миллиметровую чашку Петри над отверстием яйца.
