Подготовка среза спинного мозга для записи целоклеточного пластыря в двигательных нейронах

После рассечения спинного мозга и отделения поясничного расширения поместите расширение поясничного отдела под наклоном 35 градусов тыльной стороной вверх и каудальной стороной вниз. Впитайте излишки воды с поверхности ткани с помощью впитывающей фильтровальной бумаги. Осторожно вылейте расплавленный агарозный гель в чашку Петри, содержащую увеличение поясницы.

Поместите чашку Петри в смесь ледяной воды, чтобы обеспечить быстрое охлаждение геля. Сформируйте из геля куб размером 15 на 10 на 10 миллиметров и закрепите его на диске образца с помощью суперклея. Отрегулируйте настройки вибратома на толщину 350 микрометров, скорость от 0,14 до 0,16 миллиметра в секунду, амплитуду одного миллиметра и частоту вибрации 85 герц.

Теперь используйте пинцет с крышкой, чтобы вырезать кусочек и поместить его в инкубационную камеру, заполненную искусственной спинномозговой жидкостью, постоянно насыщенной кислородом.