Начните с подготовки двух удерживающих держателей. Используйте легкие плоскогубцы и австралийскую проволоку диаметром 0,014 дюйма, чтобы сделать спиральную петлю. Затем подготовьте пружины из нержавеющей стали по индивидуальному заказу и разрежьте пружину на подходящую длину.
Также подготовьте одну прямую австралийскую проволоку или прямую стальную проволоку длиной семь миллиметров и вырежьте два листа бумаги диаметром два миллиметра для использования в качестве барьеров. Далее поместите мышь под наркозом на операционный стол и аккуратно удалите шерсть на макушке с помощью крема для эпиляции или бритвы. Затем продезинфицируйте кожу головы мыши, чередуя раунды йодоформа и 75% спирта.
Расположите мышь головой сверху и с помощью хирургических лент зафиксируйте конечности на операционном столе. Теперь с помощью хирургических ножниц выполните дугообразный лоскут вдоль кожи головы возле шеи мыши, полностью обнажив сагиттальный шов и окружающий череп. Затем зафиксируйте лоскут кожи головы швом 6-0 на операционном столе.
Высушите череп и протравите его 37% фосфорной кислотой в течение 20 секунд. Затем используйте обычный физиологический раствор, чтобы очистить кислоту от травления. Поместите два держателя по обе стороны от теменных костей, в трех миллиметрах от сагиттальных швов и склейте их светоотвержденным клеем.
Затем наденьте на место лоскут для кожи головы. Обозначьте положение держателей и прорежьте два небольших отверстия в коже головы в соответствующих местах. Сбросьте лоскут кожи головы, одновременно пропустив маленькие петли через отверстия, чтобы обнажить поверхность кожи.
Чтобы установить пружину и направляющую проволоку, разрежьте пружину на один миллиметр длиннее расстояния между двумя держателями. Сожмите пружину давления и поместите ее между маленькими витками с обеих сторон. Пропустите проволоку из нержавеющей стали через маленькие витки и пружину и отпустите пружину, чтобы получить начальную тягу около 30G.
Затем поместите два листа бумаги между пружиной и держателями и склейте их светоотвержденным клеем, чтобы установить барьеры на обоих концах пружины. После расширения была использована микрокомпьютерная томография для визуализации изменений в черепном шве. По сравнению с контрольной группой, черепной шов постепенно и значительно расширялся после приложения силы в течение одного дня, а пушистые костные выступы появлялись на краю кости после пяти суток.
Кроме того, визуализация минерализации с использованием метода двойного мечения, показала, что силовая нагрузка значительно активизирует остеогенез. Вновь минерализованная кость наблюдалась через семь дней, что указывает на процесс ремоделирования кости после расширения шва.
