После помещения микродиализного волокна в предплечье поместите одноразовый шприц в лоток держателя шприца на микроинфузионных насосах. Во время фазы гиперемии следует провести перфузию лактатных рингеров, физиологический раствор или раствор для транспортных средств. Прикрепите локальный нагревательный блок к коже, убедившись, что он покрывает полупроницаемую мембрану, с помощью зондового адгезивного диска.
Вставьте лазерный допплеровский флоуметрический зонд в отверстие в центре локального нагревателя и начните запись значений эритроцитов или потока эритроцитов, нажав кнопку «Пуск» в программном обеспечении для сбора данных. Наденьте автоматическую манжету для измерения артериального давления на руку человека, не имеющего инструментов. Установите локальные обогреватели на 33 градуса Цельсия, чтобы поддерживать термонейтральную температуру кожи.
Чтобы добавить комментарий к непрерывной записи в программном обеспечении для сбора данных, нажмите на текстовое поле в правом верхнем углу экрана. Введите комментарий, выберите, какой канал должен получить комментарий, и нажмите кнопку Добавить. Начните сбор базовых данных, как только поток эритроцитов стабилизируется на уровне 33 градусов Цельсия локального тепла.
Измерьте и запишите исходное артериальное давление через пять-10 минут после сбора исходных данных. Введите комментарий, конечную базовую линию в программном обеспечении для сбора данных. Выключите насосы для микроинфузии и замените шприцы с раствором лактата Рингера на шприц с наименьшей концентрацией ацетилхолина.
Закрепив новые шприцы и подтвердив перфузию жидкости через зонд, снова включите насосы для микроинфузии. Введите start минус 10 в качестве комментария к записи программного обеспечения для сбора данных. В течение последней минуты перфузии измерьте и запишите артериальное давление.
Как только перфузия для данной концентрации закончится, замените шприц на следующую по величине концентрацию. После окончательной перфузии поднимите температуру местного нагревателя до 43 градусов по Цельсию. Дайте флюсу эритроцитов стабилизироваться, и замените раствор рингеров на нитропруссид натрия.
Измеряйте и записывайте артериальное давление примерно каждые три минуты во время этой фазы максимальной вазодилатации. После того, как произойдет максимальное плато потока эритроцитов, выберите «Стоп» в правом нижнем углу программного обеспечения для сбора данных. Запишите сбор базовых данных, как показано ранее.
Исходя из требований протокола, увеличьте температуру местных обогревателей до 39 или 42 градусов по Цельсию. После того как поток эритроцитов выйдет на плато в ответ на местное тепловое воздействие, перфузируйте L-Name через зонд для микродиализа. Далее установите местные обогреватели на 43 градуса Цельсия.
Затем начните изобилие зонда микродиализа нитропруссидом натрия после того, как поток эритроцитов выйдет на плато при 43 градусах Цельсия, позволяя потоку достичь максимального плато. Как только начиналось изобилие для каждой дозы, наблюдалось непрерывное увеличение потока эритроцитов до пика, за которым следовало плато, вызванное жарой и SNP. Обилие нитропруссида натрия приводило к максимальной локальной вазодилатации, что выражалось в увеличении потока эритроцитов.
Относительно меньший поток эритроцитов наблюдался в присутствии ингибитора синтазы оксида азота. Во время максимальной локальной вазодилатации будет наблюдаться экспоненциальный рост потока эритроцитов из-за предыдущего ингибирования синтазы оксида азота. В протоколе локального нагрева L-Name был перфузирован после достижения стабильного плато в потоке эритроцитов.
В потоке эритроцитов наблюдалось быстрое снижение до тех пор, пока он не достиг нового плато в ответ на L-name. Нагрев вызвал дополнительный пиковый и надирный отклик в потоке эритроцитов.
