Выделение одного волокна из лиофилизированных скелетных мышц человека

Для начала поместите лиофилизированный образец мышц под стереомикроскоп и рассмотрите его при малом увеличении. С помощью одной пары тонких щипцов для рассечения тканей удерживайте мышцу на месте и отделяйте небольшие пучки волокон с помощью других щипцов. Изолируйте один пучок волокон и аккуратно раздразните их, пока из пучка не будут извлечены отдельные сегменты волокна.

Затем переместите волокно на чистую область чашки Петри. Исследуйте каждый отдельный сегмент волокна при 50-кратном увеличении. Попытайтесь дополнительно отделить волокно на одном конце.

Если волокно начинает ломаться, то это одно волокно. Аккуратно соберите волокно с помощью щипцов и поместите его в заранее подготовленный аликвоту денатурирующего буфера. Сильно постучите трубкой по скамейке три раза.

После этого сделайте образцы волокон вихревыми и кратковременно центрифугируйте их в течение пяти секунд при температуре 2 500G, чтобы образцы осели на дне пробирки. Дайте образцам отдохнуть при комнатной температуре в течение одного часа, прежде чем хранить их при температуре минус 80 градусов Цельсия для дальнейшего использования.