Для начала поместите предметные стекла с иммуногистохимически окрашенными участками эндометрия на штатив для предметных стекол панорамного сканера патологоанатомической визуализации. Затем поместите штатив в отсек для сканирования слайдов прибора, чтобы начать сканирование. После завершения сканирования запустите программное обеспечение для анализа изображений и создайте новую папку.
Импортируйте изображения, требующие анализа. Чтобы создать классификатор тканей, отметьте несколько тканей вместе с пустой аннотацией, чтобы создать классификатор, который идентифицирует ткань и пустые области. Используйте настройку в реальном времени, чтобы наблюдать за способностью программного обеспечения распознавать во время аннотации меток.
Чтобы построить алгоритм анализа, выберите в программном обеспечении стандартный алгоритм мультиплексной IHC и выберите отрицательные и положительные пиксели для задания цветовых параметров распознавания ячеек. Установите параметры ядра, цитоплазмы и клеточной мембраны до тех пор, пока не будут найдены оптимальные параметры для изображения. Теперь установите положительный порог распознавания клеток и оптимизируйте его до тех пор, пока не будет получен соответствующий порог.
Далее выберите в алгоритме классификатор тканей. Проверьте часть ткани внутри него, чтобы идентифицировать клетки на основе тканей. Выберите область анализа, а затем используйте установленный алгоритм для анализа изображений.
Как только анализ будет завершен, вручную проверьте точность распознавания тканей, негативного и положительного распознавания. Если распознавание изображений неточное, снова настройте алгоритм и пороговые значения параметров. Выполняйте анализ изображений до тех пор, пока он не будет успешным.
Затем экспортируйте результаты анализа. Установите различные параметры анализа в соответствии с экспрессией различных иммунных маркеров эндометрия. Используйте программное обеспечение для расчета доли иммунных клеток эндометрия.
После расчета используйте значения для оценки уровня различных иммунных клеток в эндометрии пациенток с повторным невынашиванием беременности. Различные иммунные клетки были иммуногистохимически окрашены на основе их индивидуальной экспрессии различных маркеров. Коричневое пятно представляет положительные иммунные клетки, а синее — ядро.
Различные иммунные клетки экспрессировались у женщин с повторяющимися выкидышами. Клетки CD56, по-видимому, преобладают в 16,76%, при этом клетки CD1a и Foxp3 составляют от 0,11 до 0,12% популяции иммунных клеток.
