Чувствительный к взрыву анализ для изучения судорожного поведения у дрозофил

Для начала соберите девственных мух гибридной линии tub-Gal4 и самцов мух-самцов линии UAS-cac-RNAi. Перенесите девственную и мужскую мухи в одну и ту же пробирку, чтобы собрать потомство. После трех-пяти дней окклюзии используйте щетку, чтобы собрать потомство, и мухи из tub-GL4 UAS-cac-RNA.

За сутки до тестирования пересадите мух в новые чистые флаконы с кормом. Затем осторожно поместите от четырех до шести мух, находящихся под наркозом, в отдельные свежие флаконы. Поместите камеру на штатив перед доской.

Вручную отрегулируйте фокус камеры с помощью пустого флакона. Теперь переведите флаконы с мухами на самую высокую настройку в течение 10 секунд. Немедленно положите флакон на доску и наблюдайте за мухами на предмет любого поведения, похожего на припадок.

Измеряйте время восстановления как время, необходимое для того, чтобы мухи восстановили способность стоять в вертикальном положении. Мухи с нокдауном cac показали значительно более высокие показатели судорожного поведения, чем мухи дикого типа. Процент восстановления сбитых с ног мух в течение одной секунды был значительно ниже, чем у мух дикого типа.