Настройка и эксплуатация гипергликемических и гипогликемических зажимов у мышей для контроля уровня глюкозы в крови и высвобождения инсулина

Начните с настройки насосной системы для гипогликемических или гипергликемических зажимов. Для этого наполните два шприца Hamilton инфузией инсулина и 30%-ным раствором глюкозы. Подсоедините заполненные шприцы к двум длинным трубкам удлинительной трубки, предназначенной для инфузии глюкозы и инсулина.

После присоединения шприца в сборе к соответствующим шприцевым насосам залейте каждый раствор в соответствующие удлинительные трубки. Далее налейте физраствор в шприц объемом один миллилитр и удлинительную трубку для забора крови из артерии. Затем подсоедините удлинительную трубку для инфузии к предварительно установленному катетеру яремной вены правильно анестезируемой мыши.

Удлинительная трубка для забора крови к катетеру сонной артерии животного. Используйте целлофановую ленту, чтобы скрепить трубки вместе. Поместите мышь с трубками внутрь пустого стакана объемом 500 миллилитров с подстилкой.

Зажмите верхний конец удлинительной трубки для забора крови при подключении ее к новому шприцу. Возьмите 50 микролитров крови, перелейте ее в пробирку объемом 1,5 миллилитра и измерьте уровень глюкозы в крови. Затем настаивают 50 микролитров физраствора.

Чтобы собрать кровь для измерения гормонов, извлеките дополнительно 50 микролитров крови и переложите ее в пробирку объемом 1,5 миллилитра на льду. После нулевой минуты измерения уровня глюкозы в крови запустите инсулиновый шприц-насос, чтобы влить необходимое количество инсулина. Продолжайте измерять уровень глюкозы в крови и изменяйте скорость инфузии глюкозы каждые 5-10 минут в течение 120-минутного мониторинга, пока не будет достигнуто стабильное состояние.

Для гипергликемического зажима выполните шаги, описанные для гипогликемического зажима, исключая инфузию инсулина и скорректированный стабильный уровень глюкозы в крови.