Для начала поместите обезвоженное сердце и легкие, выделенные от мыши, в чашку для вскрытия, содержащую от 40 до 50 миллилитров PBS. Поместите его под светлопольный микроскоп с 10-кратным увеличением и настройте освещение. Затем положите тыльную поверхность сердца на тарелку для вскрытия.
С помощью хирургических ножниц аккуратно отделить желудочки от предсердий после выявления перехода между стенкой желудочка и предсердия. Поместите отделенные предсердия на чашку для вскрытия сердцем вверх. Ориентируйте предсердия так, чтобы доли легких располагались сзади, левое предсердие и его придаток располагались справа, а правое предсердие и его придаток располагались слева.
Приколите оставшуюся ткань левого желудочка к диссекционной чашке, чтобы закрепить препарат. Аккуратно раздвиньте доли легких, не прилагая чрезмерных усилий, и прикрепите их к чашке для вскрытия. Далее найдите аорту с дугой аорты в центре основания сердца.
Удалите соединительную и жировую ткань вокруг основания сердца с сохранением всех выявленных ориентиров. Кроме того, удалите дугу аорты, чтобы очистить вид на основание сердца. Обнаружьте легочный ствол непосредственно справа от аорты и проследите его путь к задней части, чтобы определить легочные артерии.
Чтобы подтвердить их положение, отслеживайте их маршрут к левой доле и правой верхней или средней долям, чтобы точно определить ворота легких. Определите расположение левого и правого магистральных бронхов за аортой. Подтвердите их положение, проследив их путь к воротам легких.
Затем определите верхнюю полую вену слева от аорты и проследите ее путь в правое предсердие рядом с придатком правого предсердия. Используя тупое рассечение с помощью тонких щипцов, осторожно отделите легочные артерии от верхней поверхности предсердия, затем разрежьте их в воротах легкого и отодвиньте в сторону, чтобы открыть свободную стенку левого предсердия и легочные вены на виду. Удалите основные бронхи из ворот легкого и выбросьте бронхиальную ткань.
Осмотрите ворота легких, чтобы определить устье легочной артерии и главный бронх. Чтобы отделить предсердия и желудочки, сделайте надрез от передней части оставшегося правого желудочка и двигайтесь вверх через трехстворчатый клапан к передней стороне верхней полой вены, открывая правое предсердие с фронтальной стороны. Затем разрежьте заднюю свободную стенку правого предсердия, прилегающую к межпредсердной перегородке, чтобы создать разделение между правым и левым предсердием.
Разрежьте заднюю стенку правого желудочка рядом с межжелудочковой перегородкой, чтобы полностью разъединить левый и правый желудочки. Удалите часть базальной легочной ткани, чтобы уменьшить размер долей легких, оставив три-четыре миллиметра легочной ткани.
