Фиксация и окрашивание образцов мозга новорожденных мышей для микрокомпьютерной томографии

Для начала заполните коническую трубку объемом 50 миллилитров 40 миллилитров параформальдегида. И погружать в него только что обезглавленные неонатальные головы с помощью лопатки Патона или ложки. Храните пробирки при температуре минус четыре градуса Цельсия в течение 48 часов.

Затем поместите в головки 40 миллилитров PBS, содержащего 0,1% азида натрия, и продолжайте хранить головки в холодильнике. Для окрашивания погрузите каждую головку в коническую пробирку объемом 50 миллилитров, содержащую 40 миллилитров раствора Логула, и перемешайте ее в течение 15-20 часов на орбитальном шейкере при постоянном помешивании. Перед сканированием поместите окрашенный образец в 15-миллилитровую пробирку, содержащую 10 миллилитров 1%агроса, на 30 минут.