Электронный аппарат фон Фрея (EvF) для оценки аллодинии и боли у животных, инфицированных Trypanosoma evansi

Создайте тихую комнату с контролируемой температурой 21 градус Цельсия в 12-часовом солнечном и 12-часовом темном цикле. Аккуратно поместите каждую мышь в камеру из ПММА, расположенную на подставке из сетки площадью пять квадратных миллиметров. Дайте мышам акклиматизироваться в течение 30 минут, прежде чем оценивать исходные и экспериментальные механические пороговые значения.

Затем отрегулируйте сетчатую подставку на удобную высоту, чтобы мышей можно было оценить со всех сторон, а их брюшко и все четыре лапы были легко доступны через отверстия в сетчатом полу. Покройте поверхность под камерами абсорбирующим материалом для борьбы с мочеиспусканием и дефекацией. При использовании электронного видоискателя убедитесь, что под камерами достаточно места для рук.

После настройки электронного видоискателя для оценки механических пороговых значений проведите измерения брюшной полости, разделив брюшную полость мыши на три виртуальных участка. Чтобы получить исходные измерения, за 48 часов до заражения поместите мышей в камеры, а через полчаса после установки аппарата EVF стимулируйте обозначенную ткань, постепенно поднимая зонд обеими руками. Теперь постепенно надавливайте на ткань до тех пор, пока мышь не проявит ноцицептивное поведение.

Чтобы оценить правую заднюю лапу, обратите внимание на такие действия, как втягивание, облизывание лапы или прыжки с четырьмя лапами. Для оценки висцерального состояния наблюдайте внезапное втягивание брюшной полости, немедленное облизывание или расчесывание зондируемой области или прыжки с четырьмя лапами. Затем сохраните записанное значение на указанном электронном устройстве с помощью программы электронного видоискателя или запишите его в блокнот.

Сбросьте дисплей в нулевое положение. Прощупайте каждую мышь в соседней камере пять раз, рассчитайте их индивидуальные средние значения и повторите исходные измерения через 24 часа.