Для начала возьмите изолированные сетчатки в чашку на 24 лунки, наполненную двойной дистиллированной водой. Затем замените двойную дистиллированную воду 800 микролитрами раствора YL трипсина и инкубируйте при температуре 37 градусов Цельсия при легком встряхивании или без него в течение 4 часов 15 минут. С помощью стеклянной пипетки, смоченной в растворе YL трипсина, перенесите сетчатку в 35-миллиметровую чашку Петри, содержащую безворсовую воду двойной дистиллированной воды.
Чтобы удалить внешний ядерный слой, переверните полусферу сетчатки вниз и с помощью прямой щетки для волос аккуратно прижмите ее ко дну чашки. Используйте петлевую щетку, чтобы аккуратно смахнуть фоторецепторы сетчатки. Далее, чтобы удалить стекловидное тело, переверните полусферу сетчатки вверх.
Используйте изогнутые щипцы, чтобы захватить стекловидное тело под препарирующим микроскопом. С помощью других изогнутых щипцов возьмитесь за конец стекловидного тела в том месте, где оно соединяется со зрительным нервом. Оттяните два щипца друг от друга, чтобы удалить стекловидное тело.
Затем снова переверните сетчатку вниз и с помощью прямой щетки аккуратно прижмите ее ко дну посуды. После этого используйте петлевую щетку, чтобы пройтись по сосудистому руслу от головки зрительного нерва к периферии, чтобы удалить оставшуюся нервную ткань. Медленно вращайте сетчатку прямой щеткой и используйте петлевую щетку, чтобы удалить все небольшие кусочки нервной ткани, пока сосудистая сеть не станет чистой.
Чтобы установить сосудистую сеть сетчатки, используйте петлевую щетку, чтобы перевернуть полусферу сетчатки вверх и осторожно надавить на сосудистую сеть на предметное стекло. Затем с помощью волос прикрепите открытую сосудистую сеть к центру предметного стекла. Очистите чашеобразный сосуд сетчатки от зрительного нерва к периферии, чтобы ровно закрепить сосудистую сеть.
Повторяйте чистку зубов во всех направлениях до тех пор, пока сосудистая сеть полностью не прилипнет к слайду.
