Для начала поместите обезболенную и интубированную мышь в положение правого бокового пролежня. Отведите обе передние лапы к левому верхнему углу, а задние лапы к нижним углам. Перед разрезом продезинфицируйте левую грудную клетку 70%-ным спиртом.
После разреза и вскрытия кожи над четвертым межреберьем используйте ручную ручку для прижигания для коагуляции видимых кровеносных сосудов в подкожном и мышечном слоях. Ножницами разделите широчайшие мышцы спины и передние зубчатые мышцы по длине разреза кожи. Осторожно приподнимите четвертое ребро с помощью пары тонко изогнутых щипцов.
Сделайте точечный надрез чуть выше пятого ребра, чтобы войти в четвертое межреберье. Когда отрицательное давление в плевральной полости теряется и легкое втягивается от грудной стенки, следует расширить торакотомию спереди и сзади в четвертом межреберье. Примените два ребра ребер, чтобы расширить пространство ребер, обеспечив доступность рабочего окна площадью не менее одного квадратного сантиметра для визуализации.
Используйте два заостренных ватных аппликатора, чтобы поднять головную голову и мобилизовать левое легкое. Затем тупо разделите полупрозрачную нижнюю легочную связку. Отразите легкое спереди, чтобы визуализировать заднюю левую легочную луковицу.
Затем отрежьте примерно 10 сантиметров шелкового галстука 6-0 и поместите середину галстука сзади к воротам. Теперь переверните левое легкое кзади поверх галстука и потяните оба конца галстука спереди. Держите изогнутый зажим от комаров в доминирующей руке и пару щипцов в другой руке.
Удерживайте щипцами один свободный конец А стяжки и один раз протяните его середину над закрытым зажимом. Затем возьмитесь за середину другого свободного конца B зажимом и потяните обеими руками, чтобы зажать скользящий узел. После завязывания узла у В должна получиться петля от узла, а у А – прямая.
Чтобы подтвердить адекватную окклюзию бронха, вручную окклюзируйте отводящую трубку из эндотрахеальной трубки к аппарату искусственной вентиляции легких. Это не приведет к раздуванию левого легкого. Затем закройте разрез кожи одним или двумя простыми прерывистыми швами, сделанными нейлоновым швом 6-0.
После необходимого периода ишемии аккуратно потяните за В-конец галстука, чтобы развязать скользящий узел. Немедленно запустите реперфузионную мышцу и окклюзируйте отводящую трубку эндотрахеальной трубки к аппарату искусственной вентиляции легких для повторного надувания легкого. Во время реперфузии закройте четвертое реберное пространство одним стежком 6-0 нейлоновым швом.
Поместите мышь в лежачее положение за 15-20 минут до окончания времени реперфузии. Зафиксируйте все четыре конечности скотчем. После выполнения лапаротомии по средней линии продлите лапаротомию влево и вправо до подмышечной линии, следуя изгибу самого нижнего ребра.
С живота сделайте разрез на передней диафрагме для входа в грудную клетку. Затем разрез расширяют слева и справа от передней подмышечной линии, вдоль самого нижнего ребра. Разделите двусторонние ребра по передней подмышечной линии.
Вытяните вверх, чтобы создать торакотомию с ракушкой. Теперь отразите переднюю стенку грудной клетки вверх, чтобы обнажить сердце и двусторонние легкие. Затем наложите зажим на переднюю грудную стенку, чтобы облегчить втягивание.
Используйте изогнутый противомоскитный зажим по средней линии, чтобы втянуть диафрагму вниз для лучшей визуализации грудной клетки. Затем верните добавочную долю, которая выходит за среднюю линию, в левую грудную клетку и обратно в правую грудь. С помощью аппликатора с ватным наконечником и ножниц разделите тонкую связку, которая соединяет долю с левой грудью, отразите все легкое спереди.
Затем поместите еще одну шелковую завязку 6-0 сзади к правому воротнику. Завяжите узел вокруг правого ворота, следя за тем, чтобы все четыре доли правого легкого были окружены. Затем нанесите 200 микролитров гепарина на полудюймовую иглу 31-го калибра на туберкулиновый шприц объемом 1 куб. см.
После четырех минут пережатия правой корточки наберите артериальную кровь из левого желудочка в шприц. Наклоните иглу к левой горловине. Для получения достаточного количества крови для оценки ABG может потребоваться несколько пункций.
Пережатие левого прикорня привело к значительному снижению парциального давления кислорода в левом легком по сравнению с фиктивной торакотомией. Оценка АКГ показала, что большинство нейтрофилов были внутрисосудистыми после прикорневой пережатия левого легкого.
