Для начала используйте мульти- или бипараметрическую МРТ, чтобы определить местоположение опухоли и ее положения в предстательной железе перед операцией. Затем подготовьте пациента с помощью абдоминального доступа, инсуффляции и установки химиопорта. Установите пневмоперитонеум на 12 миллиметров.
Сделайте надрез на брюшине, чтобы освободить мочевой пузырь и рассечь периректальное пространство. Теперь откройте тазовую фасцию с обеих сторон и выполните полное рассечение передней и боковой частей простаты и мочевого пузыря. Откройте шейку мочевого пузыря и определите проксимальный отдел мочеиспускательного канала.
Разрез проксимального отдела уретры для получения доступа к задним частям предстательной железы и мочевого пузыря. Затем рассеките семенные пузырьки и пространство прямой кишки, а затем боковые аспекты простаты. Рассекаем верхушку.
Затем рассекают дистальный отдел мочеиспускательного канала. Затем завершите пузырно-уретральный анастомоз. Извлеките простату, затем зашите разрез.
Поместите свежесобранную простату в сухую емкость. Чтобы обработать простату для забора образца, сначала выберите целевые зоны на основе данных МРТ. С помощью одноразовой автоматической иглы извлекайте цилиндрические образцы из выбранных областей.
Затем определите внешнюю зону цилиндра и зажмите ее парой тканевых щипцов. Поместите цилиндр на предметное стекло и отметьте внешнюю зону тканевыми чернилами. Поместите собранные цилиндры горизонтально на диск держателя образцов, заполненный закладной средой для криостата, и перенесите их на охлаждающую пластину микротома для резки.
Затем прикрепите диск держателя образца к патрону для образца. Используйте ОКТ-соединение для введения образца ткани перед срезом. Используйте микротом криостата, чтобы разрезать образец при температуре 25 градусов Цельсия.
Соберите тонкие срезы ткани в форме цилиндра на предметные стекла под действием микроскопа. Закрепите предметные стекла в 96% этаноле, затем увлажните их в дистиллированной воде. Окрашивайте срезы в гематоксилин Харриса в течение одной минуты.
Теперь обработайте предметные стекла 30% гидроксидом аммония, чтобы сделать гематоксилин синим. Затем испачкайте выстиранные горки эозином в течение 30 секунд. Затем обезвоживают предметные стекла с увеличением титрования спиртом с последующим очищением 100% ксилолом.
Закрепите предметные стекла с помощью GPX и наденьте защитное стекло на испачканную ткань. Используйте световой микроскоп для анализа окрашенного образца, различая участки с карциномой и определяя оценку опухоли по шкале Глисона. Отметьте на предметных стеклах точные опухолевые зоны.
Затем с помощью хирургического лезвия макромикродиссекционируйте участки образца, отмеченные на предметном стекле внутри ОКТ-диска. Когда встраиваемая ткань начнет размораживаться, поднимите ткань с помощью щипцов и поместите их в правильно маркированные криопробирки. Эта методика была использована для получения опухолевого материала в 61% изученных случаев.
Из 16 предстательных желез, где приобретение опухоли было неудачным, 10 имели опухолевую нагрузку менее 10% и ни одна из них не превышала 20%. Гистопатологическое соотношение образца радикальной простатэктомии и обработанной биопсии цилиндра проводили с помощью окрашивания гематоксилином и эозином. Вдоль цилиндра были обнаружены различные гистологические узоры, такие как рисунок Глисона 3, который показал маленькие хорошо сформированные железы, выстланные раковыми клетками.
Железы неправильной формы с увеличенными атипичными клетками наблюдались в срезах по схеме Глисона 4. Образцы с интраэпителиальной неоплазией предстательной железы показали скученность клеток в протоковых пространствах.
