Для начала возьмите электронный штангенциркуль, расположите его внешнюю челюсть в середине внешнего края уха и протяните ее в ушной канал. Измерьте и запишите толщину в двух третях и одной половиной точках вдоль линии. Затем наклоните голову крысы в одну сторону, ориентируя ухо вверх.
Равномерно наносите 50 микролитров олеиновой кислоты на вентральную и тыльную стороны уха, один раз в день, в течение 25 дней. С помощью одномиллилитрового шприца, оснащенного иглой 34 или 36 калибра, введите 50 микролитров суспензии Cutibacterium acnes внутрикожно в вентральную поверхность уха. На 25 день измерьте и запишите толщину ушей.
Отрезав уши у усыпленной крысы, просверлите отверстия фиксированного размера в ушах с помощью восьмимиллиметрового кольцевого сверла. После подготовки и окрашивания ушных участков рассмотрите их под световым микроскопом. Запишите патологические изменения для последующей оценки патологоанатомом и присвойте этим изменениям баллы в соответствии с приведенной здесь таблицей.
Уши в группах олеиновой кислоты и олеиновой кислоты с cutibacterium acnes показали утолщение, уплотнение, эритему, чешуйки и комедоны с редкими кровотечениями из-за расчесывания. Гистопатологический анализ выявил паракератоз, гиперкератоз и гипертрофию в группах олеиновой кислоты и олеиновой кислоты с cutibacterium acnes. Патологическая оценка показала повышенную тяжесть в этих группах по сравнению с контрольной группой.
Иммуногистохимический анализ показал более высокую экспрессию TNF альфа в дерме группы cutibacterium acnes и олеиновой кислоты с группами cutibacterium acnes.
