ПЦР-амплификация и адапторное лигирование последовательности-мишени для выявления полигенных SNP при раке желудка

Для начала возьмем нуклеиновые кислоты, извлеченные из образцов тканей рака желудка, содержащих парафин. Поместите на лед компоненты изготовленного на заказ набора для обнаружения мультигенных суставов при раке желудка. Тщательно перемешав компоненты, центрифугируйте их в течение 10 секунд, затем последовательно добавляйте реагенты в 0,2-миллилитровую ПЦР-пробирку, и перемешивайте в течение пяти секунд путем вортексирования.

Поместите каждую реакционную пробирку на термоамплификатор и запустите программу амплификации образцов ДНК и продуктов кДНК. Разморозьте праймерный фермент пищеварения на льду. Добавьте по два микролитра фермента для расщепления праймера в каждую реакционную пробирку.

После вортексирования и центрифугирования пробирок поместите их на термоамплификатор и запустите программу разложения. Разморозьте адаптер, соединяющий реагенты на льду. Пометьте микроцентрифугу объемом 1,5 мл как переходную смесь X и добавьте необходимые компоненты.

Возьмите переваренный продукт грунтовки из термоамплификатора. Добавьте реагенты для лигирования в пробирку, сделайте вихрь в течение пяти секунд и центрифугируйте на низкой скорости в течение 10 секунд при 2 500 G. Затем поместите пробирку на термоамплификатор и запустите программу амплификации для образцов ДНК и продуктов кДНК.