Анаэробное выделение бактерий из куриного дижества в качестве улучшения культивирования

Для начала соедините по 250 миллилитров каждого углеводного, белкового, агарового и минерального растворов в автоклавной стеклянной бутылке. Укупорьте бутылку крышкой, имеющей отверстие и резиновую пробку. После дегазации смеси азотом вылейте ее в стерильные чашки Петри внутри анаэробной станции.

Затем перенесите образцы куриного кишечника на анаэробную станцию, содержащую газовую смесь азота, углекислого газа и водорода в баллонах. С помощью пары стерильных щипцов перенесите образцы кишечника из пробирки Хунгейта в стерильную чашку Петри. С помощью стерильных ножниц аккуратно разрежьте открытый участок.

Затем с помощью стерильного шпателя извлеките один грамм переваренного содержимого. Переваренное содержимое переложите в пробирку, содержащую стерильный физиологический раствор, и выполните десятикратное серийное разведение. Пипеткой отдайте 0,1 миллилитра образца из разведений 10 на отрицательную четвертую по 10 на отрицательную седьмую в стерильные и надлежащим образом маркированные медиа-планшеты.

Разложите образец стерильным шпателем Дригальского. Наконец, инкубируйте чашки Петри внутри анаэробной станции в перевернутом положении в течение 24-48 часов при температуре 39 градусов Цельсия. Было выделено 15 различных родов бактерий.

Разнообразие изолятов включает восемь штаммов, демонстрирующих новые таксономические виды, родственные членам семейств Clostridiaceae, Lactobacillaceae и Oscillospiraceae.