Получение гидрогеля и встраивание канала платформы «сосуд на пластине» (VOP) для культивирования эндотелиальных клеток пупочной вены человека (HUVEC)

Для начала растворите 0,01 грамма LAP в конической трубке объемом 50 миллилитров, содержащей 20 миллилитров PBS. Добавьте в раствор LAP три грамма метакрилата желатина и 0,2 грамма фибриногена. Поместите смесь на водяную баню при температуре 37 градусов Цельсия.

Добавьте 300 микролитров предварительно подогретого геля в каждую гидрогелевую камеру платформы VOP, чтобы внедрить жертвенный рисунок. Используйте ультрафиолетовый свет для быстрого сшивания метакрилата желатина. После повторения УФ-сшивания для всех остальных лунок пипеткой впрыскайте по одному миллилитру DPBS в каждую сторону сосудистого канала каждой лунки.

Поместите тарелку при температуре четыре градуса Цельсия на 15 минут, чтобы разжижить Pluronic F127. Перед введением клеток в каналы профункционируют DMEMF12, содержащими 1%-ный гель матча, через каналы в течение 30 минут.