Для начала приготовьте два миллиграмма на миллилитр раствора наночастиц оксида цинка с помощью DPBS. Выполняют двукратное серийное разведение, чтобы получить разные концентрации. Добавьте по 100 микролитров каждой испытуемой концентрации наночастиц оксида цинка в 96-луночный планшет.
Разбавьте бактериальную культуру до одного миллиона КОЕ на миллилитр триптическим соевым бульоном или средами TSB. Добавьте по 100 микролитров в каждую лунку, содержащую раствор наночастиц оксида цинка разной концентрации. Выдерживайте пластину при температуре 37 градусов Цельсия в течение 24 часов.
Пипеткой внесите 100 микролитров наночастиц оксида цинка с бактериальным раствором из каждой лунки и приготовьте различные десятикратные разведения злаков до 10 до отрицательных шести. Переложите 50 микролитров из четырех разведений на триптический соевый агар ТСА на средних пластинах. Инкубируйте агаровые пластины при температуре 37 градусов Цельсия в течение 24 часов.
После выбора коэффициента разведения, который поддается подсчету для каждой группы, отметьте все колонии в счетной таблице разведения и пересчитайте так, чтобы концентрация стала числом КОЕ на миллилитр. Используйте полученные данные, чтобы представить процентное соотношение живых бактерий по отношению к таковым в отрицательном контроле. Антибактериальные свойства наночастиц оксида цинка были проверены на 0,5 млн КОЕ на миллилитр штамма Pseudomonas aeruginosa.
Антимикробная активность наночастиц увеличивалась в зависимости от концентрации. Тем не менее, заметное уменьшение числа колоний бактерий по сравнению с исходной неразбавленной бактериальной культурой не было очевидным. При тестировании против штамма MRSA с концентрацией 0,5 млн КОЕ на миллилитр эти наночастицы проявили повышенную антибактериальную активность, что привело к значительному снижению образования бактериальных колоний.