Для начала взвесьте пять граммов сухого суперабсорбирующего полимера или SAP, и смешайте его с 500 миллилитрами питательного раствора MMS1. Примерно за неделю до сборки прорастите семена подорожника ланцетного на промокательной бумаге, смоченной питательным раствором MMS1, в чашке Петри. Затем инкубируйте чашку Петри в темноте при комнатной температуре.
Чтобы приступить к сборке системы SAP-AS, поместите стебель саженца в выемку на боковой стороне чашки Петри корнем внутрь, а семядолями или листьями и стеблями наружу. Покройте корни примерно 1,5-двумя граммами вермикулита. После этого увлажните корневой отсек восемью миллилитрами питательного раствора MMS1.
Очистите свободное от вермикулита пространство вдоль фильтра из нейлоновой сетки сбоку от корневого отсека и добавьте пять граммов гидратированного SAP. Затем добавьте 15 грамм гидратированного сока в отсек для заполнения. Теперь совместите боковые выемки крышки и дно чашки Петри, чтобы не повредить ножку, и закройте крышку.
Затем запечатайте чашку Петри полоской парапленки, соединив основание и крышку. Взвесьте чашку Петри и запишите ее средний вес, чтобы определить, когда SAP-AS нуждается в регидратации. Затем сложите чашки Петри, чтобы оптимизировать пространство.
Используйте непрозрачную крышку с отверстием сбоку, чтобы держать рассаду в темноте. Используя пламенную свечу или горелку Бунзена, нагрейте стеклянную пипетку и растяните стеклянную трубку, пока она плавится, чтобы отделить ее. Под стереомикроскопом сломайте кончик стеклянной пипетки, чтобы уменьшить ее внутренний диаметр.
Теперь откройте чашку Петри и определите, куда будет помещена спора. Очистите пространство между пятью граммами гидратированного сока вдоль фильтрующей мембраны из нейлоновой сетки, чтобы обнажить участок корня. Под препарирующим микроскопом возьмите спору в жидкой суспензии с помощью экструдированной пипетки, при этом пипетируйте немного жидкости перед сбором споры.
После этого аккуратно отложите споры на корень. Затем замените сок над фрагментом корня, чтобы поддерживать влажное микроокружение для корня и споры. Через 24 часа, при необходимости, ополощите корневой отсек, стараясь не смыть споры.
Совместите боковые выемки крышки с дном чашки Петри, чтобы не повредить стебель рассады, и закройте чашку Петри крышкой.
