Для начала поместите только что вырезанный блок легких крысиного сердца на марлевый лист поверх льда. Рассекаем лишний жир вокруг аорты. Затем обрежьте аорту, оставив около трех-пяти миллиметров для канюляции.
Сделайте разрез длиной один-два миллиметра в легочной артерии. Поместите обрезанный блок легкого сердца на лед прямо под канюлями. Затем используйте зажим для трубки с контролем потока, чтобы отрегулировать поток со стороны Лангендорфа для канюляции аорты.
Осторожно переведите аорту на левую канюлю. Держите его черным зажимом и завяжите шелковым швом 2/0. Полностью откройте зажим трубки управления потоком, чтобы увеличить поток от перфузии Лангендорфа.
Затем откройте зажим для последующей нагрузки. Начните следить за сердечной деятельностью с помощью программного обеспечения. Отрегулируйте блок легких сердца таким образом, чтобы передняя поверхность легких была обращена к оператору.
Завяжите левую долю легкого шелковым швом 2/0. Завяжите оставшиеся доли легких одним махом шелковым швом 2/0. Затем поверните сердце так, чтобы перевязанные легкие были направлены к спине.
С помощью пары маленьких ножниц vannas. Обрежьте двух-трехмиллиметровый участок левого придатка предсердия, чтобы создать небольшое отверстие в предсердии. Осторожно канюлируйте придаток левого предсердия к левой канюле.
Держите его черным зажимом и завяжите шелковым швом 2/0. Отрегулируйте водяную рубашку камеры сердца так, чтобы сердце находилось в центре камеры. Теперь откройте преобразователь давления на воздух.
Выберите давление в аорте в программном обеспечении. Затем нажмите на усилитель моста, затем на ноль и OK, чтобы обнулить датчик давления. Перфузируйте сердце в режиме Лангендорфа в течение 10 минут.
Затем перекачайте воздушный камень из буферного резервуара Langendorff Krebs-Henseleit в рабочий буферный резервуар Krebs-Henseleit. Откройте трехсторонний кран, ведущий от рабочего перфузата. Закройте большой зажим, ведущий к аортальной канюле и откройте поток, ведущий к ушку левого предсердия, чтобы переключиться в рабочий режим.
Перфузируйте сердце в рабочем режиме в течение 15 минут. Заполните камеру кардиоплегии 50 миллилитрами назначенного раствора для сохранения сердца. Опустите водяную рубашку и закройте трехсторонний кран со стороны режима работы.
Закройте зажим, чтобы остановить поток в направлении канюли левого предсердия. Затем откройте поток к аортальной канюле. Теперь закройте зажим со стороны Лангендорфа и на постнагрузке.
Откройте зажим от линии кардиоплегии. Смойте 15 миллилитров раствора кардиоплегии из напорной магистрали. Промойте сердце с помощью кардиоплегии через аортальную канюлю и соберите коронарные стоки.
Через три минуты закройте кардиоплегический зажим и маленький синий зажим, ведущий к аортальной канюле. Поместите бульдожий зажим на аортальную канюлю и еще один бульдожий зажим на левую канюлю. Отсоедините блок сердечной канюли от цепи и поместите его в стакан с кардиоплегией в холодильнике.
Чтобы реперфузировать сердце после холодного статического хранения, тщательно закрепите сердечный блок легких после холодного хранения на перфузионном контуре. Используйте шприц 18-го калибра с тупым концом, наполненный буфером Krebs-Henseleit, чтобы удалить воздух из канюли. Сначала подключите канюлю аорты.
Затем откройте зажим для трубки со стороны Лангендорфа. Снова подсоедините левую канюлю и убедитесь, что воздух был удален из канюли, прежде чем подключать ее к контуру перфузии. Держите зажим рабочей стороны закрытым до тех пор, пока не придет время переключиться с Лангендорфа на рабочий режим.
Аортальный кровоток от 14 до 22 миллилитров в минуту приводил к хорошему оттоку по Лангендорфу. При переходе на рабочий режим поток в аорте не менее 30 миллилитров в минуту облегчал хранение сердца в организме. Несмотря на хорошие исходные показатели, некоторые сердца не показали хорошего восстановления после длительного хранения статического электричества на холоде.
