Для начала положите герметичный пакет, содержащий замороженные высушенные фиксированные бусины лектина, на скамейку при комнатной температуре. Положите антистатическую ткань на стол, а затем расположите портативный антистатический элиминатор лицом к рабочему месту. Используя антистатический пинцет, вставьте бусины в пустой наконечник таким образом, чтобы между фиксированными бусинами с лектином были помещены две бусины-распорки.
С помощью кусачек аккуратно сожмите верхнюю часть кончика и закройте отверстие. Вручную расправьте кончик, если он согнут. Затем храните его в герметичном пакете с влагопоглотителем при температуре четыре градуса Цельсия до тех пор, пока он не понадобится.
Добавьте около 10 микролитров раствора аналитического белка в пробирку, содержащую 10 микрограммов высушенного реагента для биотинилирования. Вортексом смесь хорошо перемешать. Затем центрифугируйте его при 1000 G в течение пяти секунд при комнатной температуре.
Инкубируйте трубки в течение одного часа при комнатной температуре вдали от света. Теперь добавьте в образцы 90 микролитров зондирующего буфера, чтобы разбавить его в десять раз перед инкубацией. Откройте переднюю дверцу автоматического устройства измерения реакции.
Перенесите резервуары с жидкостью, подготовленные наконечники и аналиты в назначенные места в устройстве. Включите выключатель питания основного блока автоматизированного устройства измерения реакции. Нажмите кнопку «Начать диагностику», отображаемую на экране.
Нажмите «Анализ» на главном экране, чтобы выбрать протокол. Теперь выберите опцию BAssaySTD метода анализа и нажмите Далее. Введите названия образцов и нажмите кнопку Далее.
Затем введите названия советов и снова нажмите Далее. Подтвердите примечания справа, затем нажмите «Старт», чтобы начать измерение. Подтвердите переключение экрана в режим работы и подождите, пока стрелка «Завершить» не загорится.
После завершения измерения экран перейдет в режим получения результатов. Вставьте USB-накопитель в порт сбоку от основного блока. Нажмите «Экспорт» в режиме результата, чтобы сохранить данные в виде файла CSV для дальнейшего анализа данных и построения индивидуальных графиков в Excel.
Было замечено явное различие в характере связывания лектинов с 12 полиакриламидными сахарами. Очищенные белковые продукты, которые были подвергнуты измерению наконечника, показали повышенную реакционную способность некоторых лектинов к сахаридам.
