Для начала приготовьте нанокомпозиты оксида графена и меди. В первый день введите одну колонию бактерий из агаровой пластины в 10 миллилитров бульона с помощью петли. Инкубируйте бульон при температуре 37 градусов Цельсия с помощью встряхивающего инкубатора, установленного на 200 об/мин, в течение 24 часов.
На второй день разбавьте нанокомпозитную смесь с помощью DPBS для получения трех разных концентраций и приготовьте контрольные растворы для эксперимента. Затем диспонируйте 100 микролитров нанокомпозитной суспензии и контрольных растворов в 96-луночных планшетах. В зависимости от КОЕ разбавьте бактериальную суспензию до одного умноженного на 10 в степени шести КОЕ на миллилитр в триптическом соевом бульоне.
Введите 100 микролитров разбавленной бактериальной суспензии в лунки для образцов в 96-луночном планшете и инкубируйте планшет при температуре 37 градусов Цельсия в встряхивающем инкубаторе, установленном при 200 об/мин, в течение 24 часов. На третий день энергично перемешайте образец и бактериальные суспензии с микропипеткой объемом 200 микролитров, а затем последовательно разбавьте смесь образцов бактерий в десять раз стерильной дистиллированной водой. Затем разложите 100 микролитров разведенной бактериальной суспензии на агаровой пластине с помощью разбрасывателя и выдержите пластину при температуре 37 градусов Цельсия в течение 24 часов.
На четвертый день подсчитайте колонии бактерий и определите значения КОЕ, чтобы подтвердить антибактериальную активность нанокомпозитов с помощью уравнения. Нанокомпозиты продемонстрировали значительную антибактериальную эффективность против метициллин-резистентных Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa, уничтожив 99,8% и 84,7% этих бактерий соответственно при концентрации 500 мкг на миллилитр.
