Для начала подготовьте операционный стол с соответствующими стерильными инструментами. После выполнения хирургической полевой антисептики у животного, находящегося под наркозом, расположите хирургическую простыню над предпоследней парой паховых молочных желез. С помощью ножниц создайте прямоугольное отверстие в хирургической простыне и поместите четыре зажима для заднего хода, чтобы закрепить хирургическую простыню на коже животного.
С помощью скальпеля сделайте надрез примерно 10 сантиметров в длину. Добиться гемостаза подкожных сосудов с помощью гемостатических щипцов и рассасывающегося шовного материала размера два. С помощью тонкозаостренных ножниц или пальцев рассеките подкожную клетчатку, углубляя разрез так, чтобы добраться до белой линии в области брюшной мускулатуры.
С помощью щипцов Алисы захватите и поднимите мускулатуру, чтобы сделать колющий разрез в белой линии с помощью скальпеля. Введите указательный палец в разрез, чтобы оценить наличие спаек. Расширяйте разрез над белой линией каудально и краниально, избегая травмирования других органов и подлежащих структур.
Введите одну руку в брюшную полость, чтобы локализовать и вывести яичники наружу. Если расположен один из маточных рогов, аккуратно следуйте за ним до тех пор, пока не дойдете до кончика маточного рога и ипсилатерального яичника. Обнаружив яичник, аккуратно потяните его и осторожно обнаживьте.
Оцените наличие преовуляторных фолликулов, геморрагических желтых тел, циклических желтых тел и белых тел, чтобы оценить, соответствует ли ожидаемая синхронизация свинки. Аккуратно удалите фимбрии маточной трубы, покрывающей яичник, и отведите ее слизистую оболочку, чтобы найти косточку маточной трубы. Затем осторожно введите катетер Tomcat, содержащий эмбрионы, в косточку фимбрий, пока не дойдет до ампулы маточной трубы.
Приложите одномиллилитровый шприц к катетеру Tomcat, чтобы протолкнуть эмбрион, содержащий жидкость, в маточную трубу. Накройте яичник фимбриями, и верните его в брюшную полость. Если выявить костяк затруднительно, используйте круглую иглу для наложения швов, чтобы создать карман на ампулах яйцевода.
Затем вставьте катетер tomcat с эмбрионами. Далее переместите структуры внутрь брюшной полости. Чтобы предотвратить спайки, добавьте в брюшную полость один литр физраствора или раствора лактата Рингера, температурированного до 39 градусов Цельсия.
Далее зашить мускулатуру живота рассасывающимся швом размера два в X прерывистых швов. Закройте кожу этилцианоакрилатным клеем. После очистки операционной раны нанесите рапамицин или мазь Пирсона и накройте область марлей.
Наконец, нанесите хирургический клей. Девять свинок были прооперированы, в среднем 185 клонированных эмбрионов были перенесены на одну свинку, в общей сложности 1 664 эмбриона были перенесены двусторонним путем. Ни у одного животного не было признаков интенсивной боли после операции, со средней оценкой боли от 0,33 до 4,67 по шкале боли от нуля до 18, проведенной в течение трех послеоперационных дней для каждой из свинок.
