Для начала поместите от трех до шести дехорионированных эмбрионов в чашку Петри, содержащую среду Данио с добавлением 0,02% трикаина. После того, как эмбрионы будут обезболены, перенесите их в стеклянную посуду размером 35 на 15 миллиметров с минимальным содержанием среды. Быстро добавьте от 300 до 400 микролитров агарозы с низкой температурой плавления 1% с низкой температурой плавления, содержащей трикаин, чтобы создать купол.
С помощью щипцов расположите эмбрионы так, чтобы они лежали прямо в контакте со стеклом вентральной стороной вверх. Далее положите примерно 0,5 микролитра магнитных шариков поверх агарозы. Затем добавьте каплю Danios medium, содержащую 0,02% трикаина, поверх агарозы и бусин.
Исходя из образца и размера сердца, выберите подходящую бусину и с помощью пинцета поместите ее поверх желтка эмбриона. Создайте желтковое поражение или отверстие в центре желтка с помощью одного рычага пинцета. Поместите бусину в очаг поражения и осторожно надавите на нее спереди, пока она не достигнет венозного полюса.
Если одного отсасывания недостаточно для перемещения шарика, осторожно протолкните его к предсердию, прикладывая достаточное давление, чтобы направить его в полость перикарда. После прививки магнитных бусин в эмбрионы добавьте от одного до двух миллилитров среды Danios, содержащей ПТУ, в стеклянную нижнюю чашку. Затем с помощью пинцета аккуратно разбить низкую температуру плавления агарозы и аккуратно извлечь зародыши.
Наконец, с помощью пастеровской пипетки перенесите эмбрионы в новую чашку Петри, содержащую среду Danios с PTU, и дайте им восстановиться и развиваться при температуре 28,5 градусов Цельсия. Магнитная бусина была правильно расположена в предсердии сердца рыбки данио, что позволило обеспечить беспрепятственный кровоток и отсутствие наблюдаемых кровоизлияний при сохранении стенок сердца.
