Этот метод может быть использован для рассмотрения некоторых основных свойств межрегиональной электрофизиологии для боковой боковой полушария, а также связи, направленности и связи. Электрофизиологическое измерение является чувствительным и эффективным методом оценки у животных нейронной деятельности. Этот протокол обеспечивает лучший способ опоры в синхронизации электрических сигналов.
Понимание основного механизма возможного изменения боковой мозг в болезни Альцгеймера патогенеза, может обеспечить новые идеи в потенциальных биомаркеров для лечения Альцгеймера. Перед операцией подтвердите глубину анестезии мыши, выполняя щепотку хвоста или ноша щипами. Далее располагаем мышью в стереотаксисном аппарате и зафиксим ее голову.
Нанесите мазь на оба глаза, чтобы держать их влажными. Затем побрить голову и стерилизовать область. Сделайте небольшой разрез от 12 до 15 миллиметров, в середине бритой области.
Используя миппы, осторожно оттяните кожу головы от средней линии. После этого, отделить кожу осторожно, и удалить остаточные ткани. Очистите череп, используя перекись водорода покрытые ватными палочками.
Под стерео микроскопом просверлите два небольших отверстия, радиус от одного до 1,5 миллиметра, как на левой, так и на правой сторонах черепа, чтобы обеспечить вставку записывающих микроэлектродов в области М2. Аккуратно удалите dura mater с помощью вольфрамовой иглы. Затем вставьте в отверстия два отдельных записывающих микроэлектрода, наполненных хлоридом натрия 0,5 моляра, под углом 60 градусов с использованием механических микроманипуляторов.
Для записи LFP медленно опустите левые и правые стеклянные электроды к координатам M2. Для контроля качества проверьте устойчивость каждого электрода с помощью дифференциального усилителя. Далее, установить процесс записи на 0,1 герц высокий проход, и 1000 герц низкий проход, с 1000 раз усиления.
Соберите оцифрованные необработанные данные LFP в стабильном состоянии, по крайней мере 60 секунд, с мышью дыхание равномерно на два вдоха в секунду, под наркозом. После записи медленно поднимите электроды из мозга. Сохранить данные и анализировать в автономном режиме, с анализом программного обеспечения.
Для выполнения кросс-корреляционного анализа, в программном обеспечении анализа, нажмите анализ, затем волновой корреляции, и импортировать данные. Далее, назначить один сигнал канала волновой формы, чтобы быть первым каналом, а другой в качестве ссылки. Установите ширину как два, и компенсируется как один.
Впоследствии установите продолжительность обоих LFPs до 100 секунд, выбрав время начала и время окончания. Затем нажмите кнопку процесса для выполнения кросс-корреляционного анализа. Нажмите файл, экспорт как, а затем сохранить кросс-корреляции результаты, соответствующие результирующей всплывающей диаграммы в текстовом формате.
После этого удалите значения корреляции во времени, колебались на нулевом плюсе и минус 01 секунде, а затем разберись с остальными данными о перекрестной корреляции. Для выполнения анализа согласованности запустите данные в программном обеспечении для анализа. Затем организуйте два сигнала LFP в качестве первого и второго волновых каналов, а затем установите значение размера блока как 4096.
Размер блока означает количество точек данных, используемых в первом для реальной трансформации. Чем больше размер блока, тем лучше разрешение частоты. Переместим пунктирные линии вручную, чтобы обеспечить точность времени для сигналов в обоих каналах, устанавливаемых как один и тот же период.
Нажмите кнопку добавить область для загрузки области и выполнить анализ согласованности. После этого нажмите файл и сохранить, как, чтобы сохранить результаты согласованности, соответствующие полученной всплывающей диаграммы в текстовом формате. Чтобы увидеть, является ли ранняя патология болезни Альцгеймера ухудшает способность боковой полости полушария, внеклеточные ЛФП были зарегистрированы в левой и правой M2 мышей APP/PS1 и диких элементов управления типа, и их перекрестная корреляция была проанализирована.
У диких мышей типа, результаты показали, что средняя корреляция между левым и правым LFPs при положительных лагах времени значительно отличается от этого при отрицательных лагах времени, подразумевая существование асимметрии полушария в областях M2 элементов управления диким типом. Для сравнения, левые и правые ЛФП мышей APP/PS1 показали более высокую синхронизацию во времени домена, что свидетельствует о снижении асимметрии между левой и правой M2. Затем гамма-колебания были отфильтрованы из ЛФП, и был проведен анализ согласованности для измерения сходства электрических сигналов в гамма-диапазоне частот. Результат показал, что гамма-согласованность между левым и правым M2 у мышей APP/PS1 была значительно выше, чем у диких мышей типа, что указывает на более высокую синхронизацию, и, следовательно, снижение боковой между левым и правым M2 у мышей APP/PS1.
Уретан является токсичным и канцерогенным, поэтому, пожалуйста, всегда будьте осторожны, и следуйте правилам безопасности при обращении с ним. Очень важно, чтобы проверить глубину анестезии ехай, для того, чтобы обеспечить стабильную LFPs записывается. Процесс записи и анализа может быть применен к другим путям мозга, особенно для лабораторий, которые не имеют систем для многокана канала записи в свободно движущихся животных.
