Непрерывная запись почечного кровотока у инструментальных крыс позволяет нам временно определить последовательность событий, которые приводят к процессу заболевания, который мы изучаем. В нашем случае это гипертония, и мы пытаемся определить, является ли снижение почечного кровотока, которое происходит при гипертонии, предшествующим или являющимся следствием высокого кровяного давления. Система, которую мы продемонстрируем сегодня, и подготовка животного действительно предназначены для обеспечения непрерывного 24-часового определения почечного кровотока в течение многих недель за один раз для изучения хронических событий и изучения крыс в их домашней среде, клетках.
Как и во всех хирургических техниках, практике, терпении и внимании к деталям, нам потребуется освоить эти процедуры до тех пор, пока реализация не будет выполнена вовремя. Для начала побрейте весь живот в области на дремоте вокруг седьмого шейного позвонка обезболенной крысы с помощью электрического клипера. После бритья протрите область три раза, чередуя 10% повидона йода и 70% этанола.
Поместите крысу в положение лежа. Сделайте сантиметровый разрез скальпелем на ворсе и левом боку. Затем выполняют тупое рассечение гемостатическими щипцами в чистом подкожном пространстве от бокового разреза до задней части шеи.
Прикрепите кожную кнопку к проточному зонду и пропустите проточный зонд через этот подкожный туннель от шеи до бокового разреза с помощью гемостатических щипцов. Затем поместите крысу в положение лежа на спине и сделайте четырех-пятисантиметровый разрез брюшной полости средней линии. Рассекните область вокруг левой почечной артерии изогнутыми микрорассекающими щипцами, обнажающими пространство, достаточное для размещения проточного зонда.
Затем тупо прокалывают левой квадратной поясничной мышцы гемостатическими щипцами и втягивают головку проточного зонда через почечную артерию под жировую ткань в брюшную полость. Поместите сетку из полиэфирного волокна на брюшную стенку. Зацепите кончик проточного зонда к левой почечной артерии и подключите его к расходомеру.
Добавьте немного геля вокруг наконечника зонда, и на расходомере появится значение расхода. Приклейте сетку из полиэфирного волокна, прикрепленную к зонду, к брюшной стенке с помощью тканевого клея и держите до высыхания и склеивания. Как только зонд будет на месте, отсоедините проточный зонд от расходомера и накройте брюшную полость пропитанной солевым раствором марлей.
Чтобы зашить зонд, поверните крысу в положение лежа. Прикрепите кожную кнопку к проточному зонду и сделайте круговую петлю проточного зонда подкожно по бокам. Зашить разрез на шее и пуговицу к коже.
Затем зашить бок четырьмя хирургическими швами. Снова подключите проточный зонд к расходомеру и поверните крысу обратно в дорсальное положение, чтобы проверить почечный кровоток. Внесите окончательные корректировки проточного зонда, чтобы оптимизировать его положение на почечной артерии.
Наконец, зашить мышцу тремя отт шелками в коже с помощью хирургического шва с четырьмя отт. Когда крыса полностью оправится от анестезии, верните крысу к клетке реакции на движение, подключите датчик потока к расходомеру крови и обеспечьте период восстановления около недели, чтобы стабилизировать зонд и измерение потока. Среднее артериальное давление и кровоток непрерывно измерялись у тупых чувствительных к соли крыс при переходе с диеты с низким содержанием соли на диету с высоким содержанием соли.
Эти репрезентативные данные от самца крысы были записаны в течение четырех недель и показаны со средним значением минуты. Явная суточная разница наблюдалась в среднем артериальном давлении и кровотоке. В то время как кровяное давление увеличивается при диете с высоким содержанием соли, кровоток имеет тенденцию уменьшаться, а не увеличиваться, что свидетельствует о повышенном сосудистом сопротивлении почек.
Большим преимуществом этой методики является то, что она может изучать почечный кровоток в течение длительных периодов времени, а главное в неанестезированных условиях. Это имеет большое значение при изучении реакции на различные раздражители, где вы можете использовать одно и то же животное в контролируемых неанестезированных условиях и следить за этим же животным в течение коротких или очень длительных периодов, чтобы увидеть, какова реакция на какой-то конкретный стимул или патологическое заболевание.
