Трансплантация правой матки относится к одной из самых сложных микрохирургических процедур, освоенных лишь немногими. Наш протокол переводит трансплантацию правой матки с экспериментальной стадии на применимую методологию. Наш протокол приводит к высокому уровню живорождений после трансплантации матки.
В скором времени он будет способствовать применению трансплантации правой матки для реальных исследований. Терпение и выносливость являются ключевыми чертами на протяжении всей процедуры. После выполнения срединной лапаротомии на крысе, находящейся под наркозом, заготавливают правый рог матки с общей маточной полостью и шейкой матки вместе с сосудистыми ножками.
Прижигают рану и перевязывают рог левой матки полигалактиновым швом 4-0. Теперь отделите левый рог матки, примыкающий к разветвлению от общей полости матки. Отделите шейную и влагалищную части будущего трансплантата от крепления прямой кишки.
Отделяют будущий трансплантат от паравагинальной и парацервикальной связок. Используя диатермию, рассеките влагалище примерно на два-три миллиметра от шейки матки. Найдите маточную артерию и вены в местах их истоков.
Перевязывают все сосуды каудально от сосудов матки с 8-0 полиамидное место. 8-0 место Полиамидные лигатуры непосредственно вокруг правой общей подвздошной артерии и проксимальны бифуркации аорты и полой кишки. Сделайте разрез длиной от 0,5 до одного миллиметра в правой общей подвздошной артерии, непосредственно прилегающей к бифуркации.
Вставьте тупую прямую иглу 25 калибра в просвет, чтобы смыть его. Закрепите иглу полиамидной лигатурой 6-0. Чтобы обеспечить отток во время промывания, рассеките общую подвздошную вену каудально до лигатуры в правой общей подвздошной вене.
Используя трехмиллилитровый шприц, промойте матку холодным раствором Рингера, а затем раствором для сохранения органов с добавлением гепарина и ксилазина. Разрезают общую подвздошную артерию каудальной лигатуры при бифуркации брюшной аорты. Затем, используя тупое рассечение, отрежьте общие подвздошные сосуды от бифуркации полой вены аорты в месте разделения маточных сосудов.
И удаляют трансплантат, когда ткани матки бледнеют. Поместите трансплантат в холодный раствор для сохранения органов, чтобы облегчить подготовку и хранение заднего стола перед трансплантацией. Поместив трансплантат в брюшную полость и расположив трансплантатную вену, поместите один полиамидный шов 10-0 в угол черепа и один свободный шов в каудальный угол щели на правой общей подвздошной вене.
Анастомозирует одну сторону вены трансплантата в вену реципиента, используя шесть-восемь петель непрерывного шва. Точно так же анастомозируйте другую сторону сосуда, начиная с внешней стороны. Затем, используя полиамид 10-0, завяжите один узел на шве черепной стойки и другой узел на каудальном шве.
Выполнить артериальный анастомоз с использованием полиамидных прерывистых швов 10-0 на правой общей подвздошной артерии с восемью-10 петлями. Чтобы начать перфузию трансплантата, когда участки кажутся открытыми, отпустите сосудистые зажимы на сосудах трансплантата и проверьте трансплантат на наличие признаков реперфузии. Соедините влагалищную манжету трансплантата со сводом влагалища с помощью шести-семи прерванных полигалактиновых швов 6-0.
Используя пять-семь прерывистых полиамидных 7-0 швов, анастомозируют граф маточного рога встык к оставшемуся реципиенту краниальному сегменту матки. Следите за операцией крысы после операции. После трансплантации матки у двух крыс группы 1 наблюдались признаки беременности.
Тем не менее, обследование выявило расширенную матку, предполагая, что детеныши развивались нормально, но крысы не смогли родить детенышей. Гистологическое исследование плодов показало, что детеныши развивались вплоть до родов. Пять крыс группы 2 показали беременность, трое из которых родили детенышей.
Самка Льюиса рожала дважды. Все детеныши в первом помете выжили, в то время как выжили только двое из трех щенков из второго помета. Коричневая норвежская самка также родила дважды, и все выжившие детеныши показали нормальное развитие.
Адаптация протокола улучшила как прямые хирургические исходы, так и частоту живорождений после трансплантации матки. Это увеличило двухнедельную выживаемость трансплантата с 50% в 1-й группе до 75% во 2-й группе. Важно, чтобы шовный узел в каудальном углу оставался свободным для лучшей регулировки и предотвращения эффекта поджатых струн.
Трансплантация правой матки особенно подходит для оценки предтрансплантационных подходов, которые могут улучшить результаты трансплантации матки, такие как перфузия подкожных органов ex vivo или другие методы смягчения повреждения органов. Вообще, трансплантация матки у животных была и есть обязательная к введению для установления трансплантации матки в клинике.