В центре внимания автора: Оптимизация метода цифровой капельной ПЦР для точного количественного определения генома аденоассоциированного вируса

ПЦР DD является широко используемым методом определения титра генома AAV, но в настоящее время отсутствует протокол консенсуса. Наш протокол представляет собой валидированное пошаговое руководство по подготовке образцов и проведению ПЦР DD для точного титрования генома. По сравнению с QPCR, DD PCR имеет ряд преимуществ, включая повышенную точность, большую надежность и более абсолютную и прямую количественную оценку целевых последовательностей без необходимости использования стандартных кривых.

Кроме того, благодаря хорошо спроектированному набору праймерных зондов, DD PCR позволяет обнаружить конкретную трагедию, в отличие от других методов, которые обнаруживают всю ДНК. Разработка стандартизированного протокола консенсуса для количественного определения векторного генома повысит надежность и единообразие контроля качества рекомбинантных AAV в различных лабораториях. Это облегчит как исследования, так и клиническое применение рекомбинантных векторов AAV для более широкого сообщества.