Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Method Article
E. coli plazmid DNA arıtma moleküler klonlama için bir temel tekniktir. En az 5 ml bakteri kültürü Küçük ölçekli arıtma (miniprep) daha fazla enzimatik reaksiyonları (polimeraz zincir reaksiyonu ve restriksiyon enzimi sindirim) tarafından takip klon doğrulama ya da DNA izolasyonu, hızlı bir yoludur. Burada, moleküler biyoloji teknikleri için genel başlayanlar için bu son derece etkili bir tekniktir tanıtmak için amaçlayan QIAGEN QIAprep 8 Miniprep Kiti ile miniprep genel prosedürler, video kaydedildi. Tüm prosedürü yüksek tuz varlığı silika üzerine DNA adsorpsiyon takip E. coli hücrelerinin alkali lizis dayanır. 1) hazırlanması ve takas QIAprep membran, 3) yıkama ve plazmid DNA elüsyon üzerine DNA adsorpsiyon bakteriyel lizat, 2): Bu üç adımdan oluşur. Tüm adımlar, fenol, kloroform, CSCL, etidyum bromür, kullanmadan ve alkol yağış olmadan yapılmaktadır. Genellikle tüm prosedürü tamamlamak için en az 2 saat sürer.
The authors have nothing to disclose.
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır