JoVE Logo

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Açıklamalar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Özet

E. coli plazmid DNA arıtma moleküler klonlama için bir temel tekniktir. En az 5 ml bakteri kültürü Küçük ölçekli arıtma (miniprep) daha fazla enzimatik reaksiyonları (polimeraz zincir reaksiyonu ve restriksiyon enzimi sindirim) tarafından takip klon doğrulama ya da DNA izolasyonu, hızlı bir yoludur. Burada, moleküler biyoloji teknikleri için genel başlayanlar için bu son derece etkili bir tekniktir tanıtmak için amaçlayan QIAGEN QIAprep 8 Miniprep Kiti ile miniprep genel prosedürler, video kaydedildi. Tüm prosedürü yüksek tuz varlığı silika üzerine DNA adsorpsiyon takip E. coli hücrelerinin alkali lizis dayanır. 1) hazırlanması ve takas QIAprep membran, 3) yıkama ve plazmid DNA elüsyon üzerine DNA adsorpsiyon bakteriyel lizat, 2): Bu üç adımdan oluşur. Tüm adımlar, fenol, kloroform, CSCL, etidyum bromür, kullanmadan ve alkol yağış olmadan yapılmaktadır. Genellikle tüm prosedürü tamamlamak için en az 2 saat sürer.

Açıklamalar

The authors have nothing to disclose.

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

Say 6Temel Protokolleriplazmid DNAar tmaQiagen

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır